[發明專利]一種表達雙報告標簽的重組副流感病毒5型

在審

• 申請號: 202110272641.2
• 申請日: 2021-03-13
• 公開（公告）號: CN113025631A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: 劉拂曉;王遷遷;單虎
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: C12N15/45
• 分類號: C12N15/45;C12N7/01;C12N15/62;C12N15/11
• 代理公司: 北京識然知識產權代理事務所(普通合伙) 11975
• 代理人: 曾慶國

1.一種用于拯救表達eGFP-T2A-NLuc融合序列的重組副流感病毒5型的核酸片段，其特征在于，所述核酸片段的結構為3′-NP-V/P-M-F-SH-HN-L-5′，其中NP、V/P、M、F、SH、HN和L為副流感病毒5型的自身基因；eGFP-T2A-NLuc為融合序列，其上游包含M基因起始序列和PmeI酶切位點，下游包含Not I酶切位點及V/P基因終止序列；eGFP為增強型綠色熒光蛋白序列；T2A為Thosea asigna virus 2A自剪切肽序列；Nluc為NanoLuc熒光素酶序列。

2.如權利要求1所述的核酸片段，其特征在于，所述核酸片段的序列為SEQ ID NO:1。

3.權利要求1或2所述的核酸片段在細胞內拯救重組副流感病毒5型的應用。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述的細胞為BSR-T7/5細胞和MDBK細胞。

5.一種能共表達eGFP和NLuc的重組副流感病毒5型，其特征在于，所述的重組副流感病毒5型是使用權利要求1或2所述的核酸片段在細胞內拯救獲得的。

6.一種用于檢測權利要求5所述的重組副流感病毒5型的引物對，其特征在于，所述的引物對中，其上游引物序列為5′-GCAATCATCCGCAGTGCAATTTGA-3′，下游引物序列為5′-TGCGGGAATGCTGATGGATGGCAT-3′。