[發(fā)明專利]基于熒光的多循環(huán)核酸測序反應(yīng)用成像試劑、試劑盒在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110271458.0 | 申請日： | 2021-03-12 |
| 公開（公告）號： | CN115074425A | 公開（公告）日： | 2022-09-20 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王玲玲;王亞文 | 申請（專利權(quán)）人： | 鄭州思昆生物工程有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6869 | 分類號： | C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 450001 河南省鄭州市自貿(mào)試驗區(qū)鄭*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 基于 熒光 循環(huán) 核酸 測序反 應(yīng)用 成像 試劑 試劑盒 | ||
1.一種基于熒光的多循環(huán)核酸測序反應(yīng)用成像試劑，其特征在于，包括3,4-二羥基苯甲酸乙酯、4-羥基-3-甲氧基苯乙酮和抗壞血酸鈉。
2.如權(quán)利要求1所述的基于熒光的多循環(huán)核酸測序反應(yīng)用成像試劑，其特征在于，3,4-二羥基苯甲酸乙酯、4-羥基-3-甲氧基苯乙酮和抗壞血酸鈉的濃度配比為1：1：2.5。
3.如權(quán)利要求1或2所述的基于熒光的多循環(huán)核酸測序反應(yīng)用成像試劑，其特征在于，還包括3-[(3-膽酰胺基丙基)二甲基銨基]-1-丙磺酸鹽。
4.如權(quán)利要求1或2所述的基于熒光的多循環(huán)核酸測序反應(yīng)用成像試劑，其特征在于，不包括熒光猝滅抑制劑和自由基清除劑。
5.如權(quán)要求3所述的基于熒光的多循環(huán)核酸測序反應(yīng)用成像試劑，其特征在于，還包括Tris緩沖劑。
6.如權(quán)利要求5所述的基于熒光的多循環(huán)核酸測序反應(yīng)用成像試劑，其特征在于，其配方組成為90～110mM Tris，750～850mM NaCl，15～25mM 3,4-二羥基苯甲酸乙酯，15～25mM4-羥基-3-甲氧基苯乙酮，37.5～62.5mM抗壞血酸鈉，0.1～0.2wt％3-[(3-膽酰胺基丙基)二甲基銨基]-1-丙磺酸鹽，余量為水，pH＝8.0。
7.如權(quán)利要求6所述的基于熒光的多循環(huán)核酸測序反應(yīng)用成像試劑，其特征在于，其配方組成為：100mM Tris，800mM NaCl，20mM 3,4-二羥基苯甲酸乙酯，20mM 4-羥基-3-甲氧基苯乙酮，50mM抗壞血酸鈉，0.1wt％3-[(3-膽酰胺基丙基)二甲基銨基]-1-丙磺酸鹽，余量為水，pH＝8.0。
8.一種核酸測序用試劑盒，其特征在于，包括延伸試劑、切割試劑、成像試劑和洗滌劑；其中延伸試劑中包括修飾核苷酸，修飾核苷酸分子上連接有可逆阻斷部分；其中切割試劑包括作用在可逆阻斷部分的組分，使可逆阻斷部分脫離修飾核苷酸分子；所述成像試劑為如權(quán)利要求1～7任一項所述的成像試劑。
9.如權(quán)利要求8所述的核酸測序用試劑盒，其特征在于，所述修飾核苷酸分子上通過可切割接頭連接有標(biāo)記分子；所述可切割接頭包含一個或多個可裂解基團；所述可裂解基團包括二硫鍵、和/或疊氮化物；所述切割試劑還包括作用在可裂解基團的組分使標(biāo)記分子脫離修飾核苷酸分子；所述可逆阻斷部分為甲基疊氮；所述洗滌劑中包括抗氧化劑和/或切割劑清除劑。
10.如權(quán)利要求9所述的核酸測序用試劑盒，其特征在于，所述切割試劑包括三-(羥丙基)膦；所述洗滌劑中包括胱氨酸，硫辛酸，3，3′-二硫代二丙酸或聚乙二醇化的疊氮化物；所述洗滌劑中還包括沒食子酸和/或抗壞血酸鈉；延伸試劑中還包括聚合酶。
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