[發(fā)明專利]一株產(chǎn)L-木酮糖菌株及其應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110271344.6 | 申請(qǐng)日: | 2021-03-12 |
| 公開(公告)號(hào): | CN112980731B | 公開(公告)日: | 2022-10-04 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 江凌;蔣成;劉偉;朱麗英;朱政明 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 南京工業(yè)大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C12N1/20 | 分類號(hào): | C12N1/20;C12P19/02;C12R1/125 |
| 代理公司: | 江蘇致邦律師事務(wù)所 32230 | 代理人: | 徐蓓;尹妍 |
| 地址: | 211816 江*** | 國(guó)省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一株產(chǎn) 木酮糖 菌株 及其 應(yīng)用 | ||
本發(fā)明涉及一株產(chǎn)L?木酮糖菌株及其應(yīng)用。所述菌株分類命名為枯草芽孢桿菌(
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一株產(chǎn)L-木酮糖菌株及其應(yīng)用。
背景技術(shù)
隨著人們對(duì)健康的重視以及肥胖、糖尿病等健康問題的影響,低糖食品受到越來越多的關(guān)注。L-木酮糖可以抑制α-葡萄糖苷酶,降低血液中的葡萄糖含量,目前已有含L-木酮糖的降血糖藥物。L-木酮糖在醫(yī)療、食品和健康領(lǐng)域有廣大的應(yīng)用前景。
許多稀少糖現(xiàn)已通過“Izumori”策略實(shí)現(xiàn)了酶法產(chǎn),截至目前,已經(jīng)篩選并鑒定了至少 18 種酮糖 3-差向異構(gòu)酶,它們對(duì)D-塔格糖、D-阿洛酮糖、D-果糖、L-核酮糖具有較高的底物特異性。但酶法合成L-木酮糖的報(bào)道卻很少。目前僅有文獻(xiàn)報(bào)道來源于非食品安全菌株Mesorhizobium loti 的L-核酮糖3-差向異構(gòu)酶,可催化L-核酮糖合成L-木酮糖;以及中國(guó)專利文獻(xiàn)CN109486720B公開的一種產(chǎn)4-木糖醇脫氫酶的枯草芽孢桿菌,可以木糖醇為底物合成L-木酮糖。然而,4-木糖醇脫氫酶只有輔因子NAD+的存在情況下才能合成L-木酮糖,成本昂貴,難以滿足工業(yè)化產(chǎn)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的第一目的在于提供一株產(chǎn)L-木酮糖菌株。
為實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的,本發(fā)明采用如下方案:
一株產(chǎn)L-木酮糖菌株,其分類命名為枯草芽孢桿菌(
本發(fā)明的另一目的在于提供上述菌株在產(chǎn)L-木酮糖中的應(yīng)用。
所述產(chǎn)L-木酮糖菌株可利用L-核酮糖合成L-木酮糖。
作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn),本發(fā)明采用以菌株靜息細(xì)胞作為催化劑的全細(xì)胞催化法催化底物L(fēng)-核酮糖合成L-木酮糖。
將所述菌株進(jìn)行種子培養(yǎng)、發(fā)酵培養(yǎng)后,取發(fā)酵培養(yǎng)液離心重懸,洗滌后棄上清,獲取所述靜息細(xì)胞。之后將靜息細(xì)胞懸浮于緩沖液中,與底物溶液混合反應(yīng)。
作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn),反應(yīng)體系中底物L(fēng)-核酮糖添加濃度為10~60 g/L。
反應(yīng)體系中pH為3~10;優(yōu)選pH7~10。
反應(yīng)體系中溫度為25~50℃;優(yōu)選35~50℃。
反應(yīng)時(shí)間為16~24h。
本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明篩選獲得一株產(chǎn)L-木酮糖菌株,屬于枯草芽孢桿菌,可以轉(zhuǎn)化L-核酮糖合成L-木酮糖。利用L-核酮糖產(chǎn)L-木酮糖,轉(zhuǎn)化率可達(dá)35%。用本發(fā)明篩選獲得菌株產(chǎn)L-木酮糖具有安全環(huán)保高效的特點(diǎn),在醫(yī)療、食品和健康領(lǐng)域有廣大的應(yīng)用前景。
附圖說明
圖1為產(chǎn)L-木酮糖菌株的分離與鑒定。
圖2為枯草芽孢桿菌B616系統(tǒng)發(fā)育樹。
圖3為半胱氨酸硫酸咔唑法測(cè)定L-木酮糖標(biāo)準(zhǔn)曲線。
圖4為枯草芽孢桿菌B616的生長(zhǎng)曲線。
圖5為底物濃度對(duì)L-木酮糖產(chǎn)量的影響。
圖6為pH對(duì)L-木酮糖產(chǎn)量的影響。
圖7為溫度對(duì)L-木酮糖產(chǎn)量的影響。
圖8為
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