[發(fā)明專利]一種透明質酸片段的新應用及制造方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110270013.0
• 申請日: 2021-03-12
• 公開（公告）號: CN114848667A
• 公開（公告）日: 2022-08-05
• 發(fā)明（設計）人: 郭田田;王家麒;李鑫榮;賈瀟瀟;吳書音;惠鑫瑤;桐輝;崔家友;張之輝;叢振昱;王起飛;王鳳舞;宋琳;惠覓宙
• 申請（專利權）人: 青島農(nóng)業(yè)大學;青島惠諾德生物科技有限公司;紹興惠薈科技有限公司
• 主分類號: A61K31/728
• 分類號: A61K31/728;A61P29/00;C12P19/14;C12P19/04
• 代理公司: 北京方韜法業(yè)專利代理事務所(普通合伙) 11303
• 代理人: 馬麗蓮

本發(fā)明公開了一種透明質酸片段作為人單個核細胞移走促進劑的應用、通過皮下或靜脈注射作為人淋巴細胞和液體回流和淋巴細胞的免疫調節(jié)劑的應用以及作為人中性粒細胞移走抑制劑的應用；透明質酸片段為使用PH20充分酶解透明質酸原料制造而成、能通過0.22μm濾膜、平均分子量為35±8KDa的透明質酸片段。本發(fā)明還公開了上述透明質酸片段在制備治療人單個核細胞、中性粒細胞移走相關炎癥性疾病藥物中的應用，以及在制備治療人淋巴細胞和液體回流相關炎癥性疾病藥物中的應用。本發(fā)明還公開了上述透明質酸片段的制造方法以及制造分子量大小不一的透明質酸片段的方法。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了透明質酸片段的新制造方法、作用機制和應用，為透明質酸片段的藥學研究奠定了基礎。

技術領域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)學領域，特別是涉及一種透明質酸片段的新應用及制造方法。

背景技術

目前，科學社會對于人體細胞外基質透明質酸的生理功能和藥學功效還是沒有統(tǒng)一的看法。最早的透明質酸產(chǎn)品都是平均分子量大于1200kDa的治療關節(jié)炎的注射液，如Durolane and Synvisc。文獻研究表明透明質酸的生理和藥學功效于其分子量大小有關。文獻研究還表明人初乳提取的平均分子量35kDa的透明質酸片段有多種生理功能和藥學功效。人初乳提取的平均分子量35kDa的透明質酸片段在女性乳房由透明質酸酶切割制造。女性乳房是性腺，其透明質酸酶是男性性腺睪丸的精子頂體透明質酸酶PH20。

本發(fā)明人使用重組人透明質酸酶PH206小時酶解分子量300-1600kDa的透明質酸原料，制造了平均分子量35kDa的有生物活性的透明質酸片段B-HA。本發(fā)明人還使用生物活性透明質酸片段B-HA做原料，制造了1類醫(yī)療器械B-HA產(chǎn)品(LUQIN Food Drug MedicalDevice registration number:20190021)。這些1類醫(yī)療器械B-HA產(chǎn)品曾被用來進行說明書外臨床研究臨床表現(xiàn)為紅腫硬痛的皮膚粘膜炎癥。這些皮膚粘膜外用的臨床研究結果表明生物活性透明質酸片段B-HA有明確抑制臨床上皮膚粘膜紅腫硬痛的活性)，為其臨床皮膚粘膜抗炎活性提供了事實依據(jù)，其臨床研究結果在地方雜志進行了發(fā)表和申報了專利。

上述現(xiàn)有技術對生物活性透明質酸片段B-HA的穩(wěn)定制造方法、制造原理、生物活性的作用機制和新的生物活性以及潛在新臨床應用的研究還有限，還需進一步研究和開發(fā)。

發(fā)明內容

本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種采用特殊制造方法制造的透明質酸片段的新應用及其制造方法。

為解決上述技術問題，本發(fā)明主要使用透明質酸酶PH20足量或輕度過量充分酶解高或中分子量的透明質酸原料，研究了制造平均分子量35±8KDa的透明質酸片段B-HA的穩(wěn)定制造方法和制造原理。本發(fā)明還研究了這種平均分子量35±8KDa的透明質酸片段B-HA的生物活性的作用機制以及潛在的新應用。

基于上述研究獲得如下技術方案：

一方面，本發(fā)明提供了一種透明質酸片段的新應用，所述透明質酸片段為：使用重組人透明質酸酶PH20或提取牛透明質酸酶PH20，足量或輕度過量充分酶解高或中分子量透明質酸原料制造而成的、能通過0.22μm(220nm)孔徑濾膜的、平均分子量為35±8KDa的透明質酸片段；所述應用為：所述透明質酸片段作為人單個核細胞移走促進劑的應用；和/或所述透明質酸片段通過皮下或靜脈注射作為人淋巴細胞和液體回流和淋巴細胞的免疫調節(jié)劑的應用；和/或所述透明質酸片段作為人中性粒細胞移走抑制劑的應用。