[發(fā)明專利]一種同時檢測血液樣品中多種抗風濕藥物的方法、試劑盒及其應用

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• 申請日: 2021-03-12
• 公開（公告）號: CN113049730A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發(fā)明（設計）人: 馮振;景葉松;弭兆元
• 申請（專利權）人: 山東英盛生物技術有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/72
• 代理公司: 濟南圣達知識產(chǎn)權代理有限公司 37221
• 代理人: 宋海海

本發(fā)明提供一種同時檢測血液樣品中多種抗風濕藥物的方法、試劑盒及其應用，屬于醫(yī)藥檢測技術領域。本發(fā)明能夠同時檢測阿司匹林、水楊酸及羥氯喹等三種藥物成分，在檢測過程中，通過進一步優(yōu)化前處理過程，從而有效穩(wěn)定阿司匹林的結構及破壞水解相關的酯酶，防止降解，以此確保水楊酸及羥氯喹含量測定的穩(wěn)定性、準確性，同時配套相應檢測試劑盒，該方法操作簡便快速，通量高、成本低，有效實時監(jiān)測人體內(nèi)抗風濕藥物的血藥水平，對臨床用藥提供充分依據(jù)、指導，易于臨床推廣及普及。因此具有良好的實際應用之價值。

技術領域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥檢測技術領域，具體涉及一種同時檢測血液樣品中多種抗風濕藥物的方法、試劑盒及其應用。

背景技術

公開該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已經(jīng)成為本領域一般技術人員所公知的現(xiàn)有技術。

風濕性疾病(rheumatic diseases)泛指影響骨、關節(jié)及其周圍軟組織的一組疾病，可以由感染、免疫、內(nèi)分泌、代謝、遺傳、腫瘤、退化及地理環(huán)境等因素所致。風濕性疾病可以是系統(tǒng)性，也可以為局限性的，機體免疫系統(tǒng)對自身抗原喪失耐受，產(chǎn)生自身組織器官的損傷是致病的主要機理，由此帶來的病理改變包括炎癥性及非炎癥性病變。

風濕性疾病作為一類慢性疾病，需要長期的用藥治療，如何使得藥效/療效最大化，藥物毒性、器官損傷最小化，是需要首要考慮的，也是本方法中開發(fā)的抗風濕藥物監(jiān)測的意義所在。目前抗風濕藥物最常用的藥物包括非甾體抗炎藥，如阿司匹林；改變病情抗風濕藥，如羥氯喹。

阿司匹林可以不可逆地抑制環(huán)氧化酶催化前列腺素、抗血小板聚集，達到控制關節(jié)腫痛和消炎的目的，但研究發(fā)現(xiàn)使用中會出現(xiàn)阿司匹林抵抗，其中的一個原因就是阿司匹林在經(jīng)人體吸收后會迅速降解，產(chǎn)生水楊酸，然后失去部分抗血小板的作用，因此在血藥檢測時，考慮到阿司匹林抵抗，因此有必要同時檢測阿司匹林與其代謝產(chǎn)物水楊酸。

羥氯喹作為一類改善病情的抗風濕藥，不良反應小且可逆，早期患者耐受好，可以延緩病情的發(fā)展，降低致炎物質(zhì)的產(chǎn)生，彌補非甾體類抗炎藥及皮質(zhì)激素類藥無法改變疾病進程的缺點，可與其他同類藥物以及非甾體藥物安全地聯(lián)合應用，臨床上也通常應用一種非甾體抗炎藥和至少一種改善病情抗風濕藥對風濕類疾病，如類風濕性關節(jié)炎患者進行治療，同時改善病情的抗炎藥如果確認可以緩解或控制病情，則應該持續(xù)服用，如果停用導致復發(fā)，再次服用就會無法保證能夠控制疾病。也因此本方法將羥氯喹這種改善病情的抗炎藥納入檢測的方法中，以期為臨床的聯(lián)合用藥，提供全面的藥物監(jiān)測，為臨床醫(yī)生提供有力的技術支撐。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明提供一種同時檢測血液樣品中多種抗風濕藥物的方法、試劑盒及其應用。本發(fā)明能夠同時檢測阿司匹林、水楊酸及羥氯喹等三種藥物成分，在檢測過程中，通過進一步優(yōu)化前處理過程，從而有效穩(wěn)定阿司匹林的結構及破壞水解相關的酯酶，防止降解，以此確保水楊酸及羥氯喹含量測定的穩(wěn)定性、準確性，同時配套相應檢測試劑盒，因此具有良好的實際應用之價值。

為實現(xiàn)上述技術目的，本發(fā)明采用的技術方案如下：

本發(fā)明的第一個方面，提供一種同時檢測血液樣品中多種抗風濕藥物的方法，所述抗風濕藥物包括阿司匹林、水楊酸和羥氯喹，所述方法包括：將待測血液樣品進行前處理后進行HPLC-MS/MS檢測。

其中，所述前處理過程包括：

向待測血液樣品中加入含內(nèi)標的0.5～2％(優(yōu)選為1％)甲酸的甲醇或乙腈溶液，沉淀蛋白后過濾得上清液，以含0.05～0.2％(優(yōu)選為0.1％)甲酸的10～30％(優(yōu)選為20％，v/v)甲醇或乙腈水溶液稀釋上清液，混勻后得上機樣本；