[發(fā)明專利]一種靈芝孢子粉姬松茸膠囊及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110263971.5
• 申請(qǐng)日: 2021-03-10
• 公開（公告）號(hào): CN112890167B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 潘新華;潘峰;梅愉;潘登
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江西仙客來(lái)生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A23L31/00
• 分類號(hào): A23L31/00;A23L33/10;A23L33/125;A23P10/30;C08B37/00;C12N1/14;C12N11/10;C12N11/089;C12R1/645
• 代理公司: 南昌恒橋知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 36125
• 代理人: 楊志宇

1.一種靈芝孢子粉姬松茸膠囊，其特征在于：以重量份數(shù)計(jì)包括靈芝破壁孢子粉220-230份、姬松茸提取物40-50份、淀粉68-75份、硬脂酸鎂0.8-3.5份；

所述靈芝孢子粉姬松茸膠囊的制備方法：

（1）將原料藥全部過100目篩，并按配比稱重備用；

（2）將姬松茸提取物和硬脂酸鎂、淀粉一起混合10-20min，混合均勻，得混合粉1；

（3）將混合粉1和靈芝破壁孢子粉一起混合15-30min，混合均勻，得總混物料；

（4）將上述總混物料在30萬(wàn)級(jí)潔凈車間進(jìn)行膠囊填充，0.35g/粒，得填充膠囊；再進(jìn)行拋光，得靈芝孢子粉姬松茸膠囊；

所述姬松茸提取物具體制備如下：

（1）姬松茸液體發(fā)酵培養(yǎng)：

1）將純化的姬松茸菌株固體斜面取菌，接種至PDA固體平板培養(yǎng)基上，接種量為8%-12%，25℃培養(yǎng)2天，得菌絲體；

2）再將菌絲體接至滅菌的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，裝液量20%-25%，搖床150r/min培養(yǎng)2-4天，溫度為25℃，調(diào)節(jié)pH為6-7；

3）間隔2-3天后將培養(yǎng)基補(bǔ)充液加入液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，至裝液量達(dá)25%-30%，調(diào)節(jié)pH為6-7，溫度22-26℃，搖床培養(yǎng)5-8天，全程保持無(wú)菌；

4）過濾除去發(fā)酵液，菌絲團(tuán)經(jīng)去離子水沖洗3-5遍，瀝干水分后置于烘箱中，50-60℃烘干至恒重備用；

（2）木瓜蛋白酶固定化：

1)將普魯蘭溶于10倍重量的去離子水配置成普魯蘭溶液，加入β-巰基乙胺，用磁力器攪拌20-30min，水浴60-70℃，繼續(xù)反應(yīng)1-2h；

2）加入木瓜蛋白酶和研磨均勻的環(huán)氧樹脂混合，用磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)pH為6-8，60-80℃反應(yīng)2-3h；

3）滴加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2%新戊二醇二縮水甘油醚交聯(lián)劑，攪拌均勻，水浴溫度30-40℃，聚合2-3h；

4）抽濾，將固體物質(zhì)用乙醇洗脫3-5次，再用飽和食鹽水洗脫3-5次，烘干干燥即可；

（3）姬松茸多糖酶解方法：

取步驟（1）中姬松茸干燥菌絲團(tuán)粉碎，加入30-40倍的水溶解，加入3-6%固定化后的木瓜蛋白酶，調(diào)節(jié)pH為7，在55-65℃水浴中提取3-5h，冷卻至室溫后，濾出木瓜蛋白酶，加0.15-0.2%的活性炭粉，濾液6000-8000r/min離心，保留上清液為姬松茸多糖提取液；

（4）PVDF超濾膜的制備方法：

1）將聚偏氟乙烯、聚己內(nèi)酯溶解在二甲基乙酰胺、二氯甲烷混合液中，50℃水浴加熱2h；

2）在上述溶液中加入聚乙二醇辛基醚和磷酸三乙酯，超聲30-45min，60℃水浴4-6h；

3）氮?dú)獬?0-40min后，攪拌加入羥丙甲基纖維素、甲基丙烯酸鈉和2，2-偶氮二異丁腈反應(yīng)24-26h，得鑄膜液；

4）將鑄膜液振蕩脫泡后倒在玻璃板上，用200μm厚度的刮刀均勻刮膜，待鑄膜液蒸發(fā)60-80s，將玻璃板和液膜一起放入去離子水中浸泡20-26h，取出烘干待用；

（5）姬松茸多糖分離提純方法：

用孔徑0.2-0.3μm的微濾膜過濾姬松茸多糖提取液，透過液用步驟（4）中的PVDF超濾膜超濾，調(diào)節(jié)溫度為40-50℃，pH為6-8，壓力為0.45-0.55MPa，收集過濾液，過濾液濃縮干燥后為姬松茸提取物；

所述培養(yǎng)基補(bǔ)充液組分為：姬松茸多糖酶解液15-20%、葡萄糖2.5%、玉米淀粉2.0%、麥芽粉1.2%、麩皮1.2%、硫酸鎂0.1%、磷酸二氫鉀0.3%，余量水；

所述姬松茸多糖酶解液的制備方法為：

（1）取姬松茸菌絲體干燥粉碎，加入30-40倍重量的水溶解，加3-6%固定化后的木瓜蛋白酶量，調(diào)節(jié)pH為6-8，在55-65℃水浴中提取3-5h，冷卻至室溫，濾出木瓜蛋白酶和雜質(zhì)，濾液備用；

（2）緩慢滴加1mol/L的KOH調(diào)節(jié)pH為8-9，靜置20-30min后離心；

（3）沉淀物用無(wú)水乙醇清洗3-4次，合并上清液和清洗液，減壓蒸餾除去乙醇；

（4）加入5-10%0.1mol/L的磷脂酰膽堿，調(diào)節(jié)pH為6-7，超聲30-40min后用2倍蒸餾水稀釋備用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種靈芝孢子粉姬松茸膠囊，其特征在于：所述PDA固體平板培養(yǎng)基組分為：馬鈴薯淀粉16%-18%、葡萄糖2%-3%、瓊脂1.5%-2.5%、余量水。