[發明專利]一種氧雜蒽酮類化合物及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 202110258916.7
• 申請日: 2021-03-10
• 公開（公告）號: CN113105428B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發明（設計）人: 王婷婷;何山;周靜
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C07D311/86
• 分類號: C07D311/86;C07D307/94;C12P17/06;A61P35/02;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理有限公司 33226
• 代理人: 何仲

1.一種氧雜蒽醌類化合物的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）發酵培養

將保藏號為GDMCC No: 61477的海綿共附生真菌Pleosporalessp.在馬鈴薯葡萄糖固體培養基PDA上活化3-4天后，用滅過菌的小鏟子在平板上挑取真菌菌落到馬鈴薯葡萄糖肉湯培養基PDB中，然后置于搖床上培養，于28℃和120 rpm條件下培養14天，將發酵產物過濾，分離得到發酵液和菌體沉淀，其中所述的馬鈴薯葡萄糖固體培養基配制方法如下：去皮馬鈴薯200 g，白砂糖20.0 g，海鹽35.0 g，水1 L；

（2）浸膏提取

將發酵液用與發酵液等體積的乙酸乙酯重復萃取3次，合并三次萃取所得萃取液，旋轉蒸發至干后，獲得粗浸膏；將菌體沉淀用由甲醇和二氯甲烷等體積混合而成的混合液浸泡過夜 ，然后抽濾，將濾過液減壓濃縮得到濃縮液，將濃縮液用與濃縮液等體積的乙酸乙酯重復萃取3次，合并三次萃取所得萃取液，旋轉蒸發至干后，獲得粗浸膏，合并兩次所得粗浸膏，得到總粗浸膏；

（3）化合物的分離制備

A.將總粗浸膏用體積比為1：1的二氯甲烷和甲醇混合溶劑溶解后，加200～300目硅膠拌樣進行VLC減壓柱層析，采用體積比為（1:0）-（0:1）的石油醚-乙酸乙酯溶液為流動相進行梯度洗脫，按序合并相似流分，得到6個組分Fr.1-Fr.6，其中所述的石油醚-乙酸乙酯溶液的洗脫梯度體積比依次為1：0，10:1，5:1，2.5:1，1:1，0:1；

B.將步驟（3）A收集的第2個組分進行LH-20凝膠柱層析，采用體積比為1:4的二氯甲烷-甲醇溶液為洗脫劑進行洗脫，按序合并相似流分，得到3個組分；將收集的第2個組分進行中壓柱層析，采用甲醇和水為洗脫劑，甲醇從20-80%，洗脫時間150min，按序合并相似流分，得到4個組分；將收集的第3個組分采用半制備反相高效液相色譜對化合物進行分離純化，得到氧雜蒽醌類化合物1，2，其中所述的半制備反相高效液相色譜的洗脫劑為乙腈與水按體積比35：65的比例混合，流速為2.0 mL/min；

C.將步驟（3）A收集的第3個組分進行LH-20凝膠柱層析，采用體積比為1：4的二氯甲烷-甲醇溶液為洗脫劑進行洗脫，按序合并相似流分，得到5個組分；將收集的第3個組分采用半制備反相高效液相色譜對化合物進行分離純化，得到氧雜蒽醌類化合物3，氧雜蒽醌類化合物1, 2, 3結構式如下所示：

，

其中所述的半制備反相高效液相色譜的洗脫劑為乙腈與水按體積比40：60的比例混合，流速為2.0 mL/min。