[發明專利]一種氧雜蒽酮類化合物及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 202110258916.7
• 申請日: 2021-03-10
• 公開（公告）號: CN113105428B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發明（設計）人: 王婷婷;何山;周靜
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C07D311/86
• 分類號: C07D311/86;C07D307/94;C12P17/06;A61P35/02;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理有限公司 33226
• 代理人: 何仲

本發明公開了一種氧雜蒽醌類化合物及其制備方法和用途，特點是其結構式如下化合物1?3所示，其制備方法步驟包括將保藏號為GDMCC No:61477的海綿共附生真菌通過微生物發酵培養獲取氧雜蒽醌類化合物的發酵物，然后將發酵物用乙酸乙酯提取，得粗浸膏，將該粗浸膏經減壓硅膠柱層析，凝膠柱層析，中壓柱層析和反相半制備高效液相色譜分離純化得到化合物1,2,3，優點是化合物1對CCRF?CEM細胞有較強的細胞毒活性，IC₅₀值為0.46μM，顯示它有可能成為治療人急性淋巴細胞白血病的藥物先導。

技術領域

本發明涉及一種聚酮類化合物，尤其是涉及一種氧雜蒽酮類化合物及其制備方法和用途。

背景技術

海綿共附生微生物蘊含著許多結構新穎的次級代謝產物，主要包括大環內酯類、聚酮類、環肽類、生物堿類等，這些化合物往往具有強的抗菌、抗腫瘤等藥理活性，近年來已成為海洋天然產物研究的熱點之一。海綿來源的微生物主是真菌和細菌，尤以真菌中次級代謝產物種類繁多、活性獨特而備受重視。據報道，海洋中光層（30 m?150 m水下）在海洋中擁有超過80％的生物多樣性。但是，到目前為止有關海綿共附生真菌次級代謝產物的研究鮮有報導，本發明人研究獲知從海洋中光層海綿共附生真菌（Pleosporalessp.NBUF144）次級代謝產物中分離獲得的一種聚酮類化合物，通過18S rRNA測序發現該株真菌Pleosporales sp.疑似新種，進一步對其次級代謝產物進行分離純化及活性評價。目前尚未見該化合物的化學結構及活性的報道，因此市場上也尚未見有與此相關的藥物。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種氧雜蒽酮類化合物及其制備方法和用途，氧雜蒽醌類化合物1對CCRF-CEM細胞有明顯的細胞毒作用。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種氧雜蒽醌類化合物，該化合物從海綿共附生真菌（Pleosporalessp.）分離得到，其結構式如下至少一種所示：

。

一種氧雜蒽醌類化合物的制備方法，包括如下步驟：

（1）發酵培養

將保藏號為GDMCC No: 61477的海綿共附生真菌（Pleosporalessp.）在馬鈴薯葡萄糖固體培養基（PDA）上活化3~4天后，用滅過菌的小鏟子在平板上挑取真菌菌落到馬鈴薯葡萄糖肉湯培養基（PDB）中，然后置于搖床上培養， 于28℃和120 rpm條件下培養14天，將發酵產物過濾，分離得到發酵液和菌體沉淀；

（2）浸膏提取

將發酵液用與發酵液等體積的乙酸乙酯重復萃取3次，合并三次萃取所得萃取液，旋轉蒸發至干后，獲得粗浸膏；將菌體沉淀用由甲醇和二氯甲烷等體積混合而成的混合液浸泡過液，然后抽濾，將濾過液減壓濃縮得到濃縮液，將濃縮液用與濃縮液等體積的乙酸乙酯重復萃取3次，合并三次萃取所得萃取液，旋轉蒸發至干后，獲得粗浸膏，合并兩次所得粗浸膏，得到總粗浸膏；

（3）化合物的分離制備

A.將總粗浸膏用體積比為1：1的二氯甲烷和甲醇混合溶劑溶解后，加200～300目硅膠拌樣進行VLC減壓柱層析，采用體積比為（1:0）~（0:1）的石油醚-乙酸乙酯溶液為流動相進行梯度洗脫，按序合并相似流分，得到6個組分（Fr.1~Fr.6）；

B.將步驟（3）A收集的第2個組分進行LH-20凝膠柱層析，采用體積比為1:4的二氯甲烷-甲醇溶液為洗脫劑進行洗脫，按序合并相似流分，得到3個組分；將收集的第2個組分進行中壓柱層析，采用甲醇和水為洗脫劑，甲醇從20-80%，洗脫時間150min，按序合并相似流分，得到4個組分；將收集的第3個組分采用半制備反相高效液相色譜對化合物進行分離純化，得到氧雜蒽醌類化合物1，2；