[發明專利]對蝦白斑綜合癥病毒LAMP檢測簡并引物組、試劑盒及方法

在審

• 申請號: 202110252535.8
• 申請日: 2021-03-07
• 公開（公告）號: CN112853004A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 董鋮;梁美賢;陳天藍;羅達圣;唐翔
• 申請（專利權）人: 珠海市迪奇孚瑞生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 廣東朗乾律師事務所 44291
• 代理人: 楊煥軍

1.一種對蝦白斑綜合癥病毒LAMP檢測簡并引物組，其特征在于：所述引物組包括OF、OR、IF、IR、LB，其中：

OF：5’-CTTCAGACCATATKTAAGAGTG-3’；

OR：5’-GCAGATTCCAAACCAGGAA-3’；

IF：5’-GAGCGGGCATAGAAGTGTAAAAMAT-TCTCTTCTTGGAATGATGAACG-3’；

IR：5’-TCCAATATGAAGCAATGGGAGCTA-GGTTTAAGCCATGGTCTCT-3’；

LB：5’-GTGCTAATGGCAGCTGAA-3’。

2.如權利要求1所述的LAMP檢測簡并引物組在制備用于對蝦白斑綜合癥病毒LAMP檢測試劑盒中的應用。

3.一種對蝦白斑綜合癥病毒LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述LAMP檢測試劑盒包括權利要求1所述的LAMP檢測簡并引物組。

4.根據權利要求3所述的LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述LAMP檢測試劑盒還包括LAMP反應液和顯色試劑。

5.根據權利要求4所述的LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述LAMP反應液包括5×恒溫擴增緩沖液、dNTP和DNA聚合酶；所述DNA聚合酶為Bst DNA聚合酶；所述顯色試劑包括SYBRTM Green I熒光染料。

6.根據權利要求5所述的LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述LAMP檢測簡并引物組、LAMP反應液和顯色試劑所構建的環介導等溫擴增反應體系包含，5×恒溫擴增緩沖液5μL，10mM dNTP3.5μL、10mM OF引物0.5μL、10mM OR引物0.5μL、10mM IF引物4μL、10mM IR引物4μL、10mM LB引物2μL、8U/μL Bst DNA聚合酶1μL、0.25μLSYBRTM Green I熒光染料、模板3μL，補加超純水至25μL。

7.根據權利要求3-6任意一項所述的LAMP檢測試劑盒，其特征在于：還包括陽性對照組和陰性對照組。

8.根據權利要求3-6任意一項所述的LAMP檢測試劑盒，其特征在于：還包括核酸提取試劑。

9.一種對蝦白斑綜合癥病毒的LAMP檢測方法，其特征在于，所述檢測方法采用權利要求3-8任一項所述的LAMP檢測試劑盒，所述LAMP檢測方法包括以下步驟：待檢樣品DNA的提取、環介導等溫擴增及熒光檢測。

10.根據權利要求9所述的LAMP檢測方法，其特征在于，所述環介導等溫擴增的條件為：63℃恒溫擴增40分鐘。