[發(fā)明專利]一種抗草甘膦轉(zhuǎn)基因秈稻的制備方法

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• 申請日: 2021-03-08
• 公開（公告）號: CN112997883A
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 金宇浩;李飛飛
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京艾皮專利代理有限公司 11777
• 代理人: 李德勝

本發(fā)明公開了一種抗草甘膦轉(zhuǎn)基因秈稻的制備方法，將秈稻的愈傷組織放置于抗草甘膦培養(yǎng)基中進行培育，所述抗草甘膦培養(yǎng)基的組分包括以下重量份的組分：抗草甘膦黑麥草愈傷組織13重量份、培養(yǎng)基懸浮液45重量份、中草藥制劑8重量份、改性蛋白質(zhì)3重量份、營養(yǎng)劑0.8重量份、抗菌劑0.8重量份、PH調(diào)節(jié)劑0.8重量份，該抗草甘膦轉(zhuǎn)基因秈稻的制備方法，通過將秈稻愈傷組織，放置在加入了改性蛋白質(zhì)、中草藥制劑和培養(yǎng)基懸浮液的培養(yǎng)基上培育，使得秈稻獲得抗草甘膦的特性，解決了現(xiàn)在沒有抗草甘膦的秈稻，使得秈稻施藥時較為麻煩的問題。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種秈稻的制備方法，具體是一種抗草甘膦轉(zhuǎn)基因秈稻的制備方法。

背景技術(shù)

水稻是我國乃至世界上的主要糧食作物，是全球近一半人口的主要熱量來源，然而由于雜草危害直接造成的水稻產(chǎn)量損失巨大。伴隨著人們對除草劑作用機理和代謝途徑的了解和分子生物學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，通過現(xiàn)代生物技術(shù)培育抗除草劑的農(nóng)作物，使田間化學(xué)除草技術(shù)和生物技術(shù)緊密結(jié)合，可以擴大高效與超高效低毒除草劑品種的應(yīng)用范圍，降低除草劑殘留。

草甘膦(glyphosate)即N-(phosphonomethy)glycine，商品名農(nóng)達(Roundup)，是一種廣泛應(yīng)用于水旱地雜草防除的滅生性除草劑。草甘膦施用后可被植物迅速吸收，進入植物體內(nèi)與磷酸烯醇丙酮酸競爭性地結(jié)合EPSPS(5-烯醇丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合成酶)的活性位點，終止了芳香族氨基酸的合成途徑，造成苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸等氨基酸的缺乏，最終導(dǎo)致植物死亡。草甘膦具有很好的傳導(dǎo)性能，對世界上十大多年生、深根性難除雜草均有良好效果，是一種廣譜滅生性除草劑。草甘膦進入土中遇金屬二價離子形成絡(luò)合物，通過微生物降解作用失去活性，即與土壤接觸后失去其植物毒性；與土壤具有強的親和力，在土壤中遷移性很小；在水中可發(fā)生明顯的水解作用，迅速失去活性；同時由于人類和哺乳動物體內(nèi)缺乏芳香族氨基酸合成途徑，沒有草甘膦的作用靶標酶，因此草甘瞵對人畜是沒有毒性的。由于草甘膦具有高效低毒無殘留，對人畜無毒，入土后迅速失活，不會造成土壤及地下水的污染的特點，研制抗草甘膦水稻具有很高的商業(yè)價值。

草甘膦是目前使用面積最大、使用范圍最廣的廣譜性除草劑，相對于草丁膦，草甘膦具有價格便宜，在土壤中易分解、短殘留、不易進入地下水等優(yōu)點，在水稻免耕與少耕種植中起著關(guān)鍵性作用，培育抗草甘膦除草劑的水稻對生產(chǎn)抗除草劑水稻具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種抗草甘膦轉(zhuǎn)基因秈稻的制備方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種抗草甘膦轉(zhuǎn)基因秈稻的制備方法，將秈稻的愈傷組織放置于抗草甘膦培養(yǎng)基中進行培育。

作為本發(fā)明進一步的方案：所述抗草甘膦培養(yǎng)基的組分包括以下重量份的組分：

抗草甘膦黑麥草愈傷組織10-15重量份、培養(yǎng)基懸浮液30-50重量份、中草藥制劑5-10重量份、改性蛋白質(zhì)2-4重量份、營養(yǎng)劑0.5-1重量份、抗菌劑0.5-1重量份、PH調(diào)節(jié)劑0.5-1重量份。

作為本發(fā)明再進一步的方案：所述抗草甘膦培養(yǎng)基的組分包括以下重量份的組分：

抗草甘膦黑麥草愈傷組織13重量份、培養(yǎng)基懸浮液45重量份、中草藥制劑8重量份、改性蛋白質(zhì)3重量份、營養(yǎng)劑0.8重量份、抗菌劑0.8重量份、PH調(diào)節(jié)劑0.8重量份。

作為本發(fā)明再進一步的方案：所述抗草甘膦培養(yǎng)基的制備方法包括以下步驟：

S1：制備抗草甘膦愈傷組織:取黑麥草的愈傷組織，將黑麥草的愈傷組織放置于含有草甘膦的培養(yǎng)基中培育3-5d，加入PH調(diào)節(jié)劑控制PH值為6-7，完成后得到抗草甘膦黑麥草愈傷組織；