[發(fā)明專利]一種木霉屬真菌中天然綠色色素的提取方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110251886.7 | 申請(qǐng)日： | 2021-03-08 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN112778792B | 公開（公告）日： | 2022-11-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 陸瑞利;胡豐林;尉杰;趙鋮 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C09B61/00 | 分類號(hào)： | C09B61/00;C09B67/54;C12N1/14;C12N3/00;C12R1/885 |
| 代理公司： | 合肥金安專利事務(wù)所(普通合伙企業(yè)) 34114 | 代理人： | 金惠貞 |
| 地址： | 230036 安徽*** | 國省代碼： | 安徽;34 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 木霉屬 真菌 天然 綠色 色素 提取 方法 | ||
1.一種木霉屬真菌中天然綠色色素的提取方法，其特征在于操作步驟如下：
（1）培養(yǎng)菌種
將木霉屬（
（2）擴(kuò)大培養(yǎng)
將所述菌種接種于PDB液體培養(yǎng)基中，在轉(zhuǎn)速150～250轉(zhuǎn)/分鐘、21～35℃條件下?lián)u瓶培養(yǎng)2～6天；按1～10%體積重量比（V/W）接種到大米培養(yǎng)基中，培養(yǎng)7～15天，得到大米培養(yǎng)物；
（3）孢子收集
將大米培養(yǎng)物在-50～130℃干燥，然后使用收孢機(jī)或旋風(fēng)分離器收取孢子；
（4）孢子除雜
按重量體積比1g ：0.5～5 mL，在孢子中加入除雜劑1號(hào)，在溫度10～50℃、第一次回流提取30～600分鐘，提取液回收用于下一批樣品處理；固體部分按重量體積比1g ：0.5～5mL，加入除雜劑2號(hào)，第二次回流提取30～600分鐘，提取液回收用于下一批樣品處理；固體部分再按重量體積比1g ：0.5～5 mL，加入除雜劑3號(hào)，攪拌均勻，在溫度20～90℃、超聲提取20～400分鐘，過濾或離心，棄去濾液或離心上清，得到除雜孢子；
所述除雜劑1號(hào)的配方：按體積比乙酸乙酯或三氯甲烷：石油醚為 0.1～3：3～0.1；
所述除雜劑2號(hào)配方：按體積比甲醇或乙醇：丙酮為 0.1～3：3～0.1；
所述除雜劑3號(hào)配方：按體積比水：二甲基亞砜為 1：0～0.1；
（5）制備色素粗提液
在除雜孢子中按重量體積比1g ：0.5～5 mL加入提取劑，攪拌或者超聲提取2～10小時(shí)，過濾或離心，濾液或離心上清即為色素粗提液；
所述提取劑由按體積比甲酸：乙醇為1：0~1混合的混合液；
（6）濃縮干燥
將色素粗提液減壓濃縮，減壓干燥，即得到色素粗提物；
（7）精制色素沉淀物
采用去雜法進(jìn)行精制：按重量體積比1g ：1～10 mL將色素粗提物溶解于提取劑中，加入1～20倍體積的除雜劑3號(hào)使色素沉淀，離心過濾出第一沉淀物；按重量體積比1g ：1～10mL將第一沉淀物用提取劑復(fù)溶，加入1～15倍體積的除雜劑2號(hào)使色素沉淀，離心過濾出第二沉淀物；按重量體積比1g ：1～10 mL將第二沉淀物用提取劑復(fù)溶，加入1～10倍體積的除雜劑1號(hào)使色素沉淀，離心去除上清，得到精制色素沉淀物；
所述提取劑由按體積比甲酸：乙醇為1：0~1混合的混合液；
所述除雜劑1號(hào)的配方、所述除雜劑2號(hào)的配方和所述除雜劑3號(hào)的配方同步驟（4）；
（8）干燥
將精制色素沉淀物在壓力小于或等于-0.1MP、溫度-50～120℃條件下干燥，得到色素精制品，即為墨綠色粉末狀的天然綠色色素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種木霉屬真菌中天然綠色色素的提取方法，其特征在于：步驟（1）中，所述木霉屬（
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種木霉屬真菌中天然綠色色素的提取方法，其特征在于：步驟（2）中，所述PDB培養(yǎng)基的配方：6g馬鈴薯干粉或20g去皮鮮馬鈴薯、20g葡萄糖、加水至1000mL；所述大米培養(yǎng)基為在水中浸泡10～100 mim、高壓滅菌的大米。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種木霉屬真菌中天然綠色色素的提取方法，其特征在于：步驟（4）中，所述過濾的濾膜為100～600目；離心條件為：離心轉(zhuǎn)速5000～20000轉(zhuǎn)/分鐘、時(shí)間5～20分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種木霉屬真菌中天然綠色色素的提取方法，其特征在于：步驟（5）中，所述過濾的濾膜為100～600目；離心條件為：離心轉(zhuǎn)速5000～20000轉(zhuǎn)/分鐘、時(shí)間5～20分鐘。
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