[發(fā)明專利]一種誘導(dǎo)型堿基編輯系統(tǒng)及其應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110249394.4 | 申請(qǐng)日： | 2021-03-08 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN112877314B | 公開（公告）日： | 2023-06-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 姚少華;龍潔 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 四川大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N9/78 | 分類號(hào)： | C12N9/78;C12N9/22;C12N15/113 |
| 代理公司： | 北京正華智誠(chéng)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11870 | 代理人： | 代維凡 |
| 地址： | 610041 四川*** | 國(guó)省代碼： | 四川;51 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說(shuō)明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 誘導(dǎo) 堿基 編輯 系統(tǒng) 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種誘導(dǎo)型堿基編輯系統(tǒng)，其特征在于，所述堿基編輯系統(tǒng)包括堿基編輯器，以及與其結(jié)合的雷帕霉素；所述堿基編輯器包括拆分的脫氨酶；所述脫氨酶為序列長(zhǎng)度為199個(gè)氨基酸的人胞嘧啶脫氨酶APOBEC3A；
所述人胞嘧啶脫氨酶APOBEC3A在第85位氨基酸位點(diǎn)被拆分，拆分位點(diǎn)的N端和C端分別與FRB和FKBP蛋白融合，F(xiàn)RB和FKBP能夠在雷帕霉素的誘導(dǎo)下二聚化形成異二聚體，從而組裝得到有活性的人胞嘧啶脫氨酶APOBEC3A。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)型堿基編輯系統(tǒng)，其特征在于，所述FRB和FKBP分別與脫氨酶氨基酸拆分位點(diǎn)的非結(jié)構(gòu)性環(huán)的分裂處偶聯(lián)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)型堿基編輯系統(tǒng)，其特征在于，其中的脫氨酶替換為序列長(zhǎng)度為229個(gè)氨基酸的大鼠胞嘧啶脫氨酶APOBEC1；所述大鼠胞嘧啶脫氨酶APOBEC1在第77位氨基酸位點(diǎn)被拆分。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)型堿基編輯系統(tǒng)，其特征在于，所述雷帕霉素的濃度為0.01~200nM。
5.權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的誘導(dǎo)型堿基編輯系統(tǒng)在基因編輯中的應(yīng)用。
6.一種用于進(jìn)行基因編輯的試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的誘導(dǎo)型堿基編輯系統(tǒng)。
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