[發明專利]一種吲哚喹啉酸有關物質的RT-HPLC檢測方法

在審

• 申請號: 202110249021.7
• 申請日: 2021-03-08
• 公開（公告）號: CN115032285A
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發明（設計）人: 朱麗君;陳群;陳思;楊建楠;周靜;羅琦;趙卿;李戰
• 申請（專利權）人: 遠大生命科學（武漢）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 武漢智權專利代理事務所(特殊普通合伙) 42225
• 代理人: 牛晶晶

1.吲哚喹啉酸的有關物質雜質的RT-HPLC檢測方法，其特征在于，包括下列步驟：

a)配置分析溶液

用甲醇、乙腈單一溶劑或甲醇-水、乙腈-水混合溶液溶解樣品，制成分析溶液；

b)色譜條件

色譜柱為反相色譜柱，

以酸銨鹽溶液-有機相的混合液為流動相，流動相pH范圍7.5～9.0，所述的有機相為甲醇或乙腈；采用梯度洗脫方法，流速為1.0-2.5ml/min；柱溫為25-50℃，檢測波長為210-350nm；

c)上機測定

取步驟a)制成的分析溶液5-40μl注入高效液相色譜儀，進行色譜分析，并記錄色譜圖。

2.如權利要求1所述的RT-HPLC檢測方法，其特征在于，所述有關物質為：雜質A的化學結構式為雜質B的化學結構式為4-二甲氨基吡啶的化學結構式為異構體的化學結構式為

3.如權利要求1或2所述的RT-HPLC檢測方法，其特征在于，所述反相色譜柱的填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱。

4.如權利要求3所述的RT-HPLC檢測方法，其特征在于，所述十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱為Agilent Poroshell HPH-C₁₈或Phenomenex Luna C₁₈。

5.如權利要求3所述的RT-HPLC檢測方法，其特征在于，所述十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱規格為：柱長介于50mm至300mm，色譜柱內徑介于1mm至10mm，粒徑介于1μm至10μm。

6.如權利要求1或2所述的RT-HPLC檢測方法，其特征在于，所述酸銨鹽溶液的濃度為0.2-3g/L，所述酸銨鹽選自甲酸銨、乙酸銨、碳酸氫銨、氨基甲酸銨中的一種或多種。

7.如權利要求6所述的RT-HPLC檢測方法，其特征在于，所述酸銨鹽溶液為2g/L氨基甲酸銨溶液。

8.如權利要求1或2所述的RT-HPLC檢測方法，其特征在于，梯度洗脫策略如下：所述流動相中酸銨鹽溶液-有機相的比例按0、2、7、12、17、29、30、40min時間點，水相體積比為80～87％、80～87％、63～67％、63～67％、18～22％、18～22％、80～87％、80～87％進行梯度洗脫。

9.如權利要求1所述的RT-HPLC檢測方法，其特征在于，所述樣品為吲哚喹啉酸原料藥或其制劑。