[發明專利]一種重組溶瘤腺病毒及其應用

在審

• 申請號: 202110248832.5
• 申請日: 2021-03-08
• 公開（公告）號: CN115029325A
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發明（設計）人: 魏繼武;王士群;董杰;吳靜怡
• 申請（專利權）人: 南京惟亞德生物醫藥有限公司
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N15/12;C12N15/24;A61K35/761;A61K39/395;A61P35/00;C12R1/93
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 吳爽

1.一種重組溶瘤腺病毒，其特征在于：其基因組E1和E3區域缺失，缺失區域被穩定地插入膽固醇調控元件和免疫調節元件的外源核酸序列，其中，

所述的膽固醇調控元件為包含APOA1基因或其簡并序列在內的功能元件；

所述的免疫調節元件為包含選自GM-CSF、IFN-γ、IL2、IL7、IL12、IL15、IL16、IL18、IL21、IL22、IL27、IL28和IL29基因或其簡并序列在內的功能元件；

所述的膽固醇調節元件和免疫調節元件的基因以非融合方式表達；

所述的膽固醇調節元件和免疫調節元件是以可操作地連接方式連接至外源調控序列，包括啟動子序列、增強子序列和PA序列。

2.根據權利要求1所述的重組溶瘤腺病毒，其特征在于：所述腺病毒選自C血清型亞群，包括人2型和5型腺病毒。

3.根據權利要求1所述的重組溶瘤腺病毒，其特征在于：所述啟動子序列選自組成型、組織特異型或誘導型啟動子；優選的，所述組成型啟動子選自CMV、SV40或EF1α啟動子。

4.根據權利要求1所述的重組溶瘤腺病毒，其特征在于：所述膽固醇調節元件和免疫調節元件為人源化的。

5.根據權利要求1或4所述的重組溶瘤腺病毒，其特征在于：其腺病毒為人5型腺病毒，所述膽固醇調節元件為APOA1基因，所述免疫調節元件為IL15基因。

6.根據權利要求5所述的重組溶瘤腺病毒，其特征在于：所述膽固醇調節元件APOA1的核酸序列所述膽固醇調節元件APOA1的核酸序列選自（a）或（b）：

（a）如SEQ ID NO：1所示；

（b）與SEQ ID NO：1具有60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%或99%的同源性的核酸序列；

優選的，所述免疫調節元件IL15的核酸序列選自（c）或（d）：

（c）如SEQ ID NO：2所示；

（d）與SEQ ID NO：2具有60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%或99%的同源性的核酸序列。

7.一種重組溶瘤Ad5，其包含修飾的Ad5基因組，其特征在于；該修飾包含（i）缺失野生型Ad5基因組的E1,E3區序列，但包括早期復制所需的E1A序列；（ii）編碼膽固醇代謝調節劑和/或免疫調節劑的外源性核酸序列，其中所述的外源性核酸序列被穩定地加入到至少是所述經修飾的Ad5基因組的被缺失區域；優選的，所述的編碼膽固醇代謝調節劑的外源性核酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述的編碼免疫調節劑的外源性核酸序列如SEQ ID NO：2所示。

8.權利要求1-6任一所述的重組溶瘤腺病毒、權利要求7所述的重組溶瘤Ad5在制備治療或緩解癌癥相關疾病的藥物中的應用；優選的，權利要求1-6任一所述的重組溶瘤腺病毒、權利要求7所述的重組溶瘤Ad5，與第二治療藥物在制備治療或緩解癌癥相關疾病的藥物中的應用；更優選的，所述第二治療藥物為PD1抗體。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于：所述癌癥選自膽囊癌、基地細胞瘤、肝外膽管癌、結腸癌、子宮內膜癌、子宮肌瘤、食道癌、尤因肉瘤、前列腺癌、胃癌、肝癌、肝細胞癌、霍奇金淋巴瘤、喉癌、肺癌、黑色素瘤、間皮瘤、胰腺癌、直腸癌、腎癌、甲狀腺癌、神經膠質瘤、惡性周圍神經細胞腫瘤、惡性外周神經鞘瘤、皮膚和叢狀神經纖維瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、纖維瘤、乳頭狀腺瘤、甲狀腺未分化癌、甲狀腺髓樣癌、甲狀腺濾泡癌、hurthle細胞癌、甲狀腺癌、腹水、惡性腹水、唾液腺腫瘤、唾液腺粘液表皮樣癌、唾液腺腺泡細胞癌、胃腸道基質腫瘤、導致身體潛在空間積液的腫瘤、胸腔積液、心包積液、腹膜積液、巨細胞瘤、骨巨細胞瘤、色素沉著絨毛結節性滑膜炎、腱鞘巨細胞瘤和其他肉瘤中的任一種，優選為神經膠質瘤、胰腺癌或肝癌。

10.一種藥物組合物，其含有權利要求1-7中任意一項所述的重組溶瘤腺病毒或權利要求7所述的重組溶瘤Ad5，以及藥學上可接受的載體或賦形劑；優選的，所述的組合物被配制用于瘤內施用。