[發明專利]一種番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法

在審

• 申請號: 202110248686.6
• 申請日: 2021-03-08
• 公開（公告）號: CN113008882A
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 趙曉明;于佳;于洋;李宏宇;蘇寶玲;劉泓鑠
• 申請（專利權）人: 沈陽大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N33/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于植物抗性鑒定技術領域，具體涉及一種番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法。該方法通過模擬低鉀脅迫條件，測定受測番茄品系葉片中H₂O₂的含量，根據公式計算得到品系間相對H₂O₂的含量，依據H₂O₂相對含量的多少，判定番茄品系耐低鉀能力的強弱。本發明方法簡單易行，測定周期短，結果準確性高，應用范圍廣，為早期或適期鑒定植株品系間耐低鉀性差異提供了快速有效的技術手段。

技術領域

本發明屬于植物抗性鑒定技術領域，具體涉及一種番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法。

背景技術

鉀素虧缺嚴重影響番茄的品質和產量，目前我國農田鉀平衡總體表現為虧缺態勢，且不合理的施肥導致土壤板結而影響作物營養吸收，致使農產品的生產成本較高且品質下降。由于耐低鉀基因型較鉀敏感基因型常具有更好的吸收能力，更高的利用效率及更優化的自我保護能力等方面的優勢。篩選及鑒定耐低鉀型的番茄材料，對開發新品種及推廣應用具有重要的實踐意義。

目前，番茄耐低鉀性的鑒定方法，主要包括鑒定其吸鉀量、鉀利用效率、生物量、產量、根系活力、光合作用能力等指標。通過這些指標的測定，已在多種物種中篩選鑒定得到耐低鉀型品系及鉀敏感型品系。在挖掘優質種資資源的工作中發揮了的重要的作用。但也存在著一些不足之處，如鑒定植株耐低鉀性時常將植物吸收鉀的能力(吸鉀量)及對鉀的利用效率(鉀利用效率)作為主要衡量指標，在實際測定的時候往往會出現，吸鉀量高而鉀利用效率并不高的情況，或者鉀利用效率較高而吸鉀能力并不高的情況出現，因此常需要測定其它多種生理生化指標，綜合判定植株對低鉀的耐性。使整個鑒定的周期及工作量加大。因此，迫切需要建立一種快速簡便、準確性高的番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法。

發明內容

本發明的目的是為解決上述技術問題，而提供的一種快速而簡便的番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法，以準確鑒定番茄品系間耐低鉀性的差異。

本發明提供的番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法包括如下步驟：

(1)取待測番茄品系，選擇其中無病蟲植株，置于全營養液(K⁺)及無鉀營養液(K^-)中培養；

(2)測量H₂O₂含量。取上述步驟(1)培養的植株葉片1g-2g，剪碎后加3ml 4℃預冷丙酮勻漿，10min (10000r/min)離心后留取上清液，加3ml萃取劑，再加5-10ml蒸餾水，混勻后離心1min(4000r/min), 上清液為H₂O₂待測液；

[(3)取上述步驟(2)中待測液，加入硫酸鈦溶液2ml與濃氨水3ml溶液，待沉淀形成后離心10min (3000r/min)，棄去上清液，沉淀用丙酮反復洗滌3-5次；

(4)向上述步驟(3)中沉淀加入2mol/L硫酸，待沉淀溶解后，轉入10ml容量瓶中，用蒸餾水沖洗離心管，將洗滌液合并后定容至10ml刻度，△A 415nm波長下比色；

(5)制作H₂O₂標準曲線，△A 415nm波長下比色，獲得H₂O₂濃度，根據計算公式計算植物組織中H₂O₂含量 (μmol/g FW)＝(C*Vt)/(FW*V1)，K⁺、K^-每組取3-5次重復，取平均值。式中C—標準曲線上查得樣品中H₂O₂濃度(μmol)；Vt—樣品提取液總體積(ml)；FW—植物組織鮮重(g)；V1—測定時用樣品提取液體積(ml)；

(6)分析結果，根據每種番茄品系葉片中相對H₂O₂含量(K^--K⁺)值的大小，判定其耐低鉀能力的強弱，數值越小，耐低鉀性越強；數值越大，耐低鉀性越弱。