[發(fā)明專利]一種番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110248686.6
• 申請(qǐng)日: 2021-03-08
• 公開（公告）號(hào): CN113008882A
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙曉明;于佳;于洋;李宏宇;蘇寶玲;劉泓鑠
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 沈陽大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/78
• 分類號(hào): G01N21/78;G01N33/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.本發(fā)明提供一種番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法，其步驟如下：

（1）取待測番茄品系，選擇其中無病蟲植株，置于全營養(yǎng)液（K⁺）及無鉀營養(yǎng)液（K^-）中培養(yǎng)；

（2）測量H₂O₂含量，取上述步驟（1）培養(yǎng)的植株葉片1g-2g，剪碎后加3ml 4℃預(yù)冷丙酮?jiǎng)驖{，10min （10000r/min）離心后留取上清液，加3ml萃取劑，再加5-10ml蒸餾水，混勻后離心1min（4000r/min）, 上清液為H₂O₂待測液；

（3）取上述步驟（2）中待測液，加入硫酸鈦溶液2ml與濃氨水3ml溶液，待沉淀形成后離心10min（3000r/min），棄去上清液，沉淀用丙酮反復(fù)洗滌3-5次；

（4）向上述步驟（3）中沉淀加入2mol/L硫酸，待沉淀溶解后，轉(zhuǎn)入10ml容量瓶中，用蒸餾水沖洗離心管，將洗滌液合并后定容至10ml刻度，△A 415nm波長下比色；

（5）制作H₂O₂標(biāo)準(zhǔn)曲線，△A 415nm波長下比色，獲得H₂O₂濃度，根據(jù)計(jì)算公式計(jì)算植物組織中H₂O₂含量（μmol/g FW）=（C*Vt）/（FW*V1），K⁺、K^-每組取3-5次重復(fù)，取平均值；式中C—標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣品中H₂O₂濃度（μmol）；Vt—樣品提取液總體積（ml）；FW—植物組織鮮重（g）；V1—測定時(shí)用樣品提取液體積（ml）；

（6）分析結(jié)果，根據(jù)每種番茄品系葉片中相對(duì)H₂O₂含量（K^--K⁺）值的大小，判定其耐低鉀能力的強(qiáng)弱，數(shù)值越小，耐低鉀性越強(qiáng)；數(shù)值越大，耐低鉀性越弱。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法，其特征在于，所述步驟（1）中全營養(yǎng)液（K⁺）組配方按1-3mM Ca(NO₃)₂·4H₂O，3-5mM KNO₃，0.5-1mM NH₄H₂PO₄，1-3mM MgSO₄·7H₂O，0.03-0.07mM H₃BO₃，0.005-0.01mM MnSO₄·4H₂O，0.5-1mM ZnSO₄·7H₂O，0.2-0.5mM CuSO₄·5H₂O，0.1-0.2mM(NH₄)2MoO₄，0.05-0.1mM FeSO₄·7H₂O和0.04-0.05mMNa2-EDTA配制；無鉀營養(yǎng)液（K^-）組去掉配方中KNO₃，用NaNO₃補(bǔ)齊溶液中缺乏的NO₃^-同時(shí)達(dá)到低鉀效果，將pH調(diào)節(jié)至5.8±0.1。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法，其特征在于，所述步驟（2）中取培養(yǎng)12h-24h植株葉片，萃取劑配置方法按CHCl3（三氯甲烷）：CCl4（四氯化碳）=1:3體積比混勻。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法，其特征在于，所述步驟（3）中加入5%-10%硫酸鈦溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種番茄品系間耐低鉀性差異的鑒定方法，其特征在于，所述步驟（4）中加入硫酸3ml-6ml，直至沉淀全部溶解。