[發明專利]一種鵝不食草指紋圖譜及其構建方法

有效

• 申請號: 202110247122.0
• 申請日: 2021-03-05
• 公開（公告）號: CN112858526B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 劉華明;張輝;譚沛;鄭曉英;趙偉志;馬鵬崗
• 申請（專利權）人: 華潤三九醫藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 周衛賽

1.一種鵝不食草指紋圖譜的構建方法，其特征在于，包括以下步驟，

(1)鵝不食草供試品溶液的制備：采用溶劑提取鵝不食草供試品，過濾，取濾液，所述溶劑選自水或者體積百分數為30-70％的甲醇水溶液；對照品溶液的制備：分別稱取新綠原酸、綠原酸、咖啡酸、蘆丁、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C、山金車內酯C、山金車內酯D、小堆心菊素C、短葉老鸛草素A對照品適量，精密稱定，分別置于不同棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含新綠原酸、綠原酸、咖啡酸、蘆丁、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C、山金車內酯C、山金車內酯D、小堆心菊素C、短葉老鸛草素A各50μg的溶液，即得；

(2)取鵝不食草供試品溶液和對照品溶液采用液相色譜法檢測，采用AQ-C18色譜柱，柱溫為20℃，流速為1.0mL/min，以0.02％磷酸水溶液為流動相B，以乙腈為流動相A進行梯度洗脫，所述梯度洗脫程序包括：0-35min，A：B的體積百分數為6％→11.7％：94％→88.3％；35-37min，A：B的體積百分數為11.7％→13％：88.3％→87％；37-47min，A：B的體積百分數為13％→14.7％：87％→85.3％；47-52min，A：B的體積百分數為14.7％→16.5％：85.3％→83.5％；52-54min，A：B的體積百分數為16.5％→19.5％：83.5％→80.5％；54-63min，A：B的體積百分數為19.5％→19.7％：80.5％→80.3％；63-90min，A：B的體積百分數為19.7％→20.7％：80.3％→79.3％；90-123min，A：B的體積百分數為20.7％→21.9％：79.3％→78.1％；123-127min，A：B的體積百分數為21.9％→43％：78.1％→57％；127-152min，A：B的體積百分數為43％→50％：57％→50％；152-153min，A：B的體積百分數為50％→6％：50％→94％；153-155min，A：B的體積百分數為6％：94％，洗脫時間120min，檢測波長為325nm，洗脫時間≥120min時，檢測波長為225nm；得到鵝不食草指紋圖譜和對照品指紋圖譜，峰1為新綠原酸、峰2為綠原酸、峰3為咖啡酸、峰6為蘆丁、峰7為異綠原酸B、峰8為異綠原酸A、峰10為異綠原酸C、峰11為山金車內酯D、峰12為山金車內酯C、峰13為小堆心菊素C、峰14為短葉老鸛草素A。

2.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述提取方式選自回流提取或者超聲提取；提取時溶劑的用量是鵝不食草供試品的10-50倍量；提取時間為15-60分鐘。

3.根據權利要求1或2所述的構建方法，其特征在于，所述的構建方法還包括采用鵝不食草對照藥材作為參照物按照權利要求1或2所述的構建方法制備參照物溶液并采用液相色譜法檢測參照物溶液得到參照物指紋圖譜的步驟。

4.權利要求1-3中任一項所述的鵝不食草指紋圖譜的構建方法在鵝不食草產品的質量檢測和/或鑒別中的用途。