[發明專利]植物葉片DNA提取裂解緩沖液、植物葉片DNA快速提取的方法及應用在審
| 申請號: | 202110238870.2 | 申請日: | 2021-03-04 |
| 公開(公告)號: | CN112899267A | 公開(公告)日: | 2021-06-04 |
| 發明(設計)人: | 陳慶春;黃剛;陳永佳;黃蘋;劉家勁;汪杰;侯軍亮;余慷 | 申請(專利權)人: | 阜陽華大生命科學研究院 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司 11471 | 代理人: | 劉靜榮 |
| 地址: | 236000 安徽*** | 國省代碼: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 植物 葉片 dna 提取 裂解 緩沖液 快速 方法 應用 | ||
1.植物葉片DNA提取裂解緩沖液,其特征在于,所述提取裂解緩沖液包括以下組分:65~75mM Tris-HCl、30~40mM EDTA,提取裂解緩沖液的pH為8.0。
2.根據權利要求1所述的植物葉片DNA提取裂解緩沖液,其特征在于,所述提取裂解緩沖液包括以下組分:70mM Tris-HCl、35mM EDTA,提取裂解緩沖液的pH為8.0。
3.植物葉片DNA快速提取的方法,其特征在于,所述方法包括以下步驟:
(1)取植物新鮮葉片,置于離心管中;
(2)向所述離心管中加入150μL提取裂解緩沖液,其中,所述提取裂解緩沖液包括以下組分:65~75mM Tris-HCl、30~40mM EDTA,提取裂解緩沖液的pH為8.0;
(3)研磨葉片;
(4)加熱后,離心;
(5)取上清液,得到植物葉片DNA。
4.根據權利要求3所述的植物葉片DNA快速提取的方法,其特征在于,步驟(2)中,所述離心管中還加入鋼珠。
5.根據權利要求3所述的植物葉片DNA快速提取的方法,其特征在于,步驟(3)中,將離心管在組織研磨儀上研磨20~60s。
6.根據權利要求3所述的植物葉片DNA快速提取的方法,其特征在于,步驟(4)中,將離心管在85~95℃水浴條件下加熱5~15min,取出后,10000~12000rpm離心1~3min。
7.根據權利要求3所述的植物葉片DNA快速提取的方法,其特征在于,步驟(4)中,將離心管在90℃水浴條件下加熱10min,取出后,10000~12000rpm離心1~3min。
8.根據權利要求3所述的植物葉片DNA快速提取的方法,其特征在于,步驟(4)中,將離心管在85~95℃水浴條件下加熱5~15min,取出后,12000rpm離心1min。
9.根據權利要求3所述的植物葉片DNA快速提取的方法,其特征在于,所述植物葉片為谷子、水稻、玉米、大豆、番茄或煙草的葉片。
10.權利要求1所述的植物葉片DNA提取裂解緩沖液的應用。
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