[發明專利]誘導人類多能干細胞定向內皮分化方法有效
| 申請號： | 202110235774.2 | 申請日： | 2021-03-03 |
| 公開（公告）號： | CN112980770B | 公開（公告）日： | 2022-08-02 |
| 發明（設計）人： | 董念國;謝明輝;程敏;喬韡華;曹紅;嚴格 | 申請（專利權）人： | 華中科技大學同濟醫學院附屬協和醫院 |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 武漢泰山北斗專利代理事務所(特殊普通合伙) 42250 | 代理人： | 程千慧 |
| 地址： | 430022 湖北省武*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 誘導 人類 多能 干細胞 定向 內皮 分化 方法 | ||
1.誘導人類多能干細胞定向內皮分化方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟1、第0-1天：人類誘導多能干細胞達到80％融合以上時，使用含有10-50ng/mlWNT3a和1μmol/L SU5402的RPMI/B27分化培養基，對消化后的人類誘導多能干細胞進行誘導分化；
步驟2、第1-2天：使用含有10-50ng/ml WNT3a、10-30ng/ml BMP2和1μmol/L SU5402的RPMI/B27分化培養基，對步驟1誘導分化后的細胞繼續誘導分化；
步驟3、第2-3天：使用含有10-30ng/mlBMP2和1μmol/L SU5402的RPMI/B27分化培養基，對步驟2誘導分化后的細胞繼續誘導分化為中胚層細胞；
步驟4、第4-9天:使用含有30-50ng/ml VEGF、10-15ng/ml FGF8和10-15ng/ml bFGF的EGM-2/B27培養基，對步驟3誘導分化后的細胞繼續誘導分化為內皮細胞。
2.根據權利要求1所述的誘導人類多能干細胞定向內皮分化方法，其特征在于，所述步驟2和步驟3中分化培養基中WNT3a的濃度為10ng/ml，BMP2的濃度為10ng/ml。
3.根據權利要求1所述的誘導人類多能干細胞定向內皮分化方法，其特征在于，所述步驟4的培養基中FGF8的濃度為10ng/ml。
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