[發明專利]一種鼓槌石斛SSR分子標記引物組合物及其應用

有效

• 申請號: 202110231059.1
• 申請日: 2021-03-02
• 公開（公告）號: CN112725521B
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發明（設計）人: 李杰;王再花;葉廣英;劉海林
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院環境園藝研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 尉月麗

1.一種鼓槌石斛SSR分子標記引物組合物，其特征在于：

所述的引物組合物包括：

2.一種鼓槌石斛種質鑒定、遺傳多樣性或親緣關系分析的產品，其特征在于：所述的產品包含權利要求1所述的引物組合物。

3.根據權利要求2所述的產品，其特征在于：所述的產品為獨立試劑或試劑盒。

4.權利要求1所述的引物組合物在制備鼓槌石斛種質鑒定、遺傳多樣性或親緣關系分析產品中的應用。

5.權利要求1所述的引物組合物或權利要求2所述的產品在鼓槌石斛種質鑒定、遺傳多樣性或親緣關系分析中的應用。

6.一種鼓槌石斛種質鑒定、遺傳多樣性或親緣關系分析的方法，其特征在于：所述的方法包括以下步驟：

(1)提取待測鼓槌石斛樣本的基因組DNA；

(2)以步驟(1)提取的基因組DNA為模板進行PCR擴增，用于PCR擴增的引物對的上游引物采用生物熒光基團進行修飾；

(3)將步驟(2)獲得的PCR擴增產物進行毛細管熒光電泳檢測，收集數據；

(4)根據步驟(3)獲得的數據統計分析鼓槌石斛群體的遺傳多樣性或聚類及多態信息含量；

步驟(2)中所述的PCR擴增體系為：反應體系總體積為10μL，包括1.0μL DNA模板，1.0μL10×BufferΙ緩沖液，0.1μL TAKARA HS Taq酶，引物0.6μL，0.8μL 2.5mM dNTP，去離子水補足至10μL；

步驟(2)中所述的PCR擴增體系的引物為權利要求1所述的引物組合物SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:50所示的引物；

步驟(2)中所述的PCR擴增反應程序：95℃預變性5min；95℃變性30s，依據引物的退火溫度復性30s，72℃延伸30s，40個循環；60℃延伸10min。

7.權利要求1所述的引物組合物或權利要求2所述的產品在鼓槌石斛分子標記輔助育種中的應用。