[發明專利]一種細胞色素P450單加氧酶突變體及其應用有效
| 申請號： | 202110230094.1 | 申請日： | 2021-03-02 |
| 公開（公告）號： | CN112961844B | 公開（公告）日： | 2022-03-01 |
| 發明（設計）人： | 石金田;許國超;賈煊杰;倪曄;鄭香玉 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N9/02 | 分類號： | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12P33/00;C12P33/06;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 王玉仙 |
| 地址： | 214122 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 細胞 色素 p450 單加氧酶 突變體 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種細胞色素P450單加氧酶突變體，其特征在于，所述的細胞色素P450單加氧酶突變體的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一種編碼權利要求1所述的細胞色素P450單加氧酶突變體的基因。
3.一種攜帶權利要求2所述的基因的表達載體。
4.一種表達權利要求1所述的細胞色素P450單加氧酶突變體的重組菌。
5.權利要求1所述的細胞色素P450單加氧酶突變體在催化石膽酸氧化合成熊去氧膽酸中的應用，其特征在于，具體包括：在緩沖液中，在所述細胞色素P450單加氧酶突變體的催化下，利用石膽酸進行氧化反應，形成熊去氧膽酸。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述的緩沖液為磷酸鹽濃度為0.1～0.2mol/L的磷酸鹽緩沖液。
7.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述的氧化反應的溫度為25～35℃；反應時間為2～24小時。
8.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述的石膽酸的濃度為1～500mmol/L。
9.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述的細胞色素P450單加氧酶突變體的用量為1～100kU/L。
10.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述的細胞色素P450單加氧酶突變體的添加形式為含有細胞色素P450單加氧酶突變體的粗酶液或凍干細胞。
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