[發(fā)明專利]SPL3和miR156基因在鑒定抗從枝病泡桐的應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110227237.3 | 申請日： | 2021-03-01 |
| 公開（公告）號： | CN112941221A | 公開（公告）日： | 2021-06-11 |
| 發(fā)明（設計）人： | 范國強;翟曉巧;趙振利;王哲 | 申請（專利權）人： | 河南農(nóng)業(yè)大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京慕達星云知識產(chǎn)權代理事務所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 崔自京 |
| 地址： | 450002*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | spl3 mir156 基因 鑒定 泡桐 應用 | ||
1.SPL3和miR156基因在Real-Time PCR鑒定抗從枝病泡桐中的應用。
2.一種鑒定抗從枝病泡桐的引物，其特征在于，以SPL3和miR156基因進行鑒定，且所述引物序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.3所示；
miR156F-5P-qF：GACAGAAGATAGAGAGCACAA，如SEQ ID NO.1所示；
miR156F-5P-qR：GeneCopoeia公司的All-in-OneTMmiRNA qRT-PCR Detection Kit試劑盒配有下游通用引物Universal Adaptor PCR Primer；
pau-SPL3-qF:TTCTGTCATCTAACTCTTG，如SEQ ID NO.2所示；
pau-SPL3-qR:CCTCATCACTGGATTATAG，如SEQ ID NO.3所示。
3.一種抗叢枝病泡桐的早期分子鑒定方法，其特征在于，包括下述步驟：
(1)獲取泡桐葉片：在同樹齡泡桐樣地，用高枝剪取待鑒定泡桐頂芽下部第一輪葉片；
(2)泡桐RNA抽提：采用研磨法提取泡桐葉片RNA，并用分光光度計評估RNA樣品的純度和濃度，最后純化RNA樣品，并將RNA保存在-80℃以備后用；
(3)合成cDNA：用SurescriptTMcDNA第一鏈合成試劑盒進行反轉(zhuǎn)錄反應，反應結束后，85℃滅活處理5min，-20℃保存反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物待用；
(4)SPL3和miR156表達量測定：分別以GAPDH和U6為內(nèi)參基因，利用Real-Time PCR方法和權利要求2所述引物測定SPL3和miR156的相對表達量；
(5)表達量分析：參考(4)中測定出的SPL3和miR156的表達量，將高于SPL3的平均值、同時低于miR156的平均值的幼樹認定為候選優(yōu)株。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于河南農(nóng)業(yè)大學，未經(jīng)河南農(nóng)業(yè)大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權和技術合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202110227237.3/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
