[發明專利]一種測定全血中糖化血紅蛋白的方法

有效

• 申請號: 202110215831.0
• 申請日: 2018-12-29
• 公開（公告）號: CN113009022B
• 公開（公告）日: 2023-04-28
• 發明（設計）人: 孫旭東;王值;呂志剛
• 申請（專利權）人: 江山德瑞醫療科技有限公司;孫旭東
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34
• 代理公司: 成都余行專利代理事務所(普通合伙) 51283
• 代理人: 邢智勇

本發明涉及臨床體外診斷檢測領域，公開了一種測定全血中糖化血紅蛋白的試劑盒，包括洗脫液A、洗脫液B和溶血劑，洗脫液A和洗脫液B分別包括緩沖液、表面活性劑和添加劑，溶血劑包括表面活性劑和添加劑，添加劑為蘇氨酸、β?丙氨酸、甘氨酸中的一種或一種以上；還公開了一種測定全血中糖化血紅蛋白的方法。本發明提供的糖化血紅蛋白試劑盒，可以避免樣本的測定值隨著樣本的保存時間的推移而發生變動，同時也減少了樣本前處理的復雜過程，從而實現糖化血紅蛋白的高效、準確檢測。此外，本發明提供的測定方法，對保存后的樣本也能夠實現快速、準確的檢測。

技術領域

本發明申請為申請日2018年12月29日，申請號為：201811635299.2，名稱為“一種測定全血中糖化血紅蛋白的試劑盒及方法”的發明專利申請的分案申請。

本發明涉及臨床體外診斷檢測領域，尤其涉及了一種測定全血中糖化血紅蛋白的試劑盒。

背景技術

據國際糖尿病聯盟(Internationale?Diabetes?Federation，IDF)統計，2017年全球糖尿病患者約有4.25億人。美國糖尿病控制及并發癥試驗(Diabetes?Control?andComplication?Trial，DCCT)和英國糖尿病控制與并發癥關系研究(UK?ProspectiveDiabetes?Study，UKPDS)發現糖化血紅蛋白(HbA1c)是糖尿病患者疾病控制程度的一項良好指標，它反映的是患者在檢測前120天內的平均血糖水平，該指標與抽血時間、病人是否空腹、是否使用胰島素等因素無關。在第59屆美國糖尿病協會(American?DiabetesAssociation，ADA)年會上，ADA將HbA1c作為血糖控制的金標準，提出所有糖尿病患者每年均應至少常規測定HbA1c兩次，并要求在臨床應用中，無論用什么方法反應血糖的變化，最后都要以HbA1c的變化作為最終評價一種藥物或一個治療方案的有效檢測指標。因此，HbA1c檢測的臨床意義非常重要。

目前HbA1c的檢測方法主要包括色譜法、免疫法和電泳法。其中色譜法包括高效液相陽離子交換色譜法和高效液相硼酸親和色譜法等。作為HbA1c檢測的金標準，高效液相陽離子交換色譜法一向是臨床上最具應用價值、最精確的方法。

利用高效液相陽離子交換色譜法測定全血中HbA1c的原理是：全血樣本用溶血劑溶血釋放目標蛋白，由于樣本中糖化血紅蛋白(HbA1c)和非糖化血紅蛋白(HbA0)的等電點不同，因此，在弱酸性條件下它們各自所帶正電荷的數量不同，所以，樣品經過糖化血紅蛋白分析柱時，與分析柱中帶有負電荷的離子交換固定相的吸附和交換能力存在差異，然后采用兩種不同鹽濃度的洗脫液(洗脫液A和洗脫液B)將各組份分離；首先用低鹽濃度的洗脫液A將HbA1c洗脫，再用高鹽濃度的洗脫液B將HbA0洗脫；被洗脫的蛋白依次通過檢測器，檢測器自動記錄其在415nm的光吸收強度變化，并將光信號轉化為電信號，得到物質信號譜圖，對收集到的譜圖數據進行分析計算得出HbA1c、HbA0峰的面積，HbA1c峰面積占總血紅蛋白Hb峰面積的百分含量即為人全血樣本中HbA1c的檢測結果。

然而，在用上述液相離子交換色譜法測定HbA1c的研究時，樣本(例如全血樣本、全血稀釋樣本、全血凍干樣本等)保存后再進行HbA1c檢測時，測定值會隨著樣本的保存時間的推移而變動。

公開號為CN101595230A的發明專利公開了一種HbA1c測定方法，同時也指出了含Hb試樣保存后再進行HbA1c檢測時，將得到比使用剛采集的含Hb試樣的測定值低的值。該專利采用在樣本中加入抑制劑的方法來避免因保存樣本而引起的HbA1c測定值的變動，但是，該方法需要測量者的直接參與，使測量過程復雜化，從而大大降低了檢測效率。

發明內容

本發明針對現有技術中樣本保存后再進行HbA1c檢測的測定值會隨著樣本的保存時間的推移而變動的缺點，提供了一種測定全血中糖化血紅蛋白的試劑盒及方法，利用該試劑盒可以高效、準確地體外定量測定人全血試樣中糖化血紅蛋白的濃度，而測定值不受樣本保存時間的影響。