[發明專利]一種咖啡乳制品中糠醛類化合物的凈化檢測方法

在審

• 申請號: 202110209682.7
• 申請日: 2021-02-25
• 公開（公告）號: CN112986437A
• 公開（公告）日: 2021-06-18
• 發明（設計）人: 扶曉菲;游春蘋;劉振民;邢倩倩;程浩
• 申請（專利權）人: 光明乳業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 北京東正專利代理事務所(普通合伙) 11312
• 代理人: 李夢福

本發明公開了一種咖啡乳制品中糠醛類化合物的凈化檢測方法，該方法包括以下步驟：在咖啡乳制品樣品中加入草酸溶液水浴加熱，冷卻至室溫；然后加入三氯乙酸溶液A，震蕩混合后，離心，取上清液，濾渣加入三氯乙酸溶液B，震蕩混合后，離心；合并上清液，加入三氯乙酸溶液B定容；將定容上清液中加入活性炭，震蕩后水浴加熱，冷卻至室溫；取樣品溶液過尼龍濾膜，使用高效液相色譜儀進樣分析。本發明綜合了液相色譜和活性炭的優點，選擇將活性炭添加至前處理的定容體系中，然后水浴加熱，既使得咖啡乳制品原始色譜圖的基線漂移、雜峰較多等情況極大程度的改善；同時確保糠醛類化合物的有效檢出。

技術領域

本發明涉及化合物檢測技術領域，具體涉及一種咖啡乳制品中糠醛類化合物的凈化檢測方法。

背景技術

食物中的還原糖與其中的蛋白質等經熱處理工藝后，常常會發生非酶褐變反應，也即美拉德反應，并在反應的前期、中期、后期產生不同的潛在危害物質。以5-羥甲基糠醛(5-HMF)、糠醛(F)、呋喃基甲基酮(FMC)和甲基糠醛(MF)為代表的糠醛類化合物是美拉德反應進展階段的一種產物，在蜂蜜、咖啡、乳制品等各類食品中具有不同含量的分布。歐洲食品安全委員會推薦每人每日的羥甲基糠醛(HMF)攝入上限為1.6mg，少量的糠醛類化合物具有為食品增香調色的功能，但過量攝入糠醛類化合物也被報道具有損害心臟等器官及誘發糖尿病等慢性疾病的風險。

咖啡乳制品營養豐富，一方面牛奶被譽為“白色血液”，自身就富含乳蛋白、乳糖、優質脂肪等豐富的營養元素，而咖啡的添加又進一步補充了維生素B、游離脂肪酸、咖啡因、單寧酸等營養物質；另一方面，咖啡乳制品作為一種風味獨特、口味香醇的乳制品，隨著大眾生活習慣的改變和消費水平的提升，迎合了消費者的口味需要，在國內外越來越受歡迎；但相關研究也提示，咖啡乳制品兼含咖啡和牛奶成分更加復雜，由于咖啡和牛奶本身都在其各自的加工工藝的過程中產生以5-HMF、F、FMC、F這4類為主的糠醛類化合物，且咖啡中糠醛類化合物相對較高，因此有必要對咖啡乳制品中的糠醛類化合物進行檢測，從而確保國民飲食的營養、健康和安全。

糠醛類化合物的相關研究，目前主要圍繞在以HMF和F為代表的糠醛類化合物的液相色譜及液質聯用快檢方法開發等方面，檢測方法主要集中于3類，分別是液相色譜串聯紫外檢測器法、液相色譜串聯熒光檢測法和液相色譜串聯質譜檢測法，其中液相色譜串聯紫外檢測器法因其簡單操作、成本較低而得到廣泛應用，本發明選用了液相色譜串聯紫外檢測器法(基于我公司開發的糠醛類化合物HPLC快檢方法，專利申請號：201811562740.9)；在此基礎之上，針對咖啡乳制品成分更為復雜的問題，其糠醛類化合物的檢測存在諸多干擾因素，其色譜圖雜峰較多且部分波段出現基線漂移。因此需要開發一種咖啡乳制品中糠醛類化合物的凈化檢測方法，以解決咖啡乳制品因成分復雜而出現色譜峰偏離基線及雜峰雜陳、無法有效檢測的問題。

發明內容

本發明的目的是提供一種咖啡乳制品中糠醛類化合物的凈化檢測方法，通過添加適宜比例的活性炭，探索合適色譜雜峰的凈化時間和溫度，在確保糠醛類化合物有效檢出的前提下，解決咖啡乳制品因成分復雜而出現色譜峰偏離基線及雜峰雜陳的問題。

本發明為達到上述目的，具體通過以下技術方案得以實現的：

一種咖啡乳制品中糠醛類化合物的凈化檢測方法，該方法包括以下步驟：

(1)在咖啡乳制品樣品中加入草酸溶液水浴加熱，冷卻至室溫；

(2)然后加入三氯乙酸溶液A，震蕩混合后，轉速4-5g下離心，取上清液，濾渣加入三氯乙酸溶液B，震蕩混合后，轉速4-5g下離心；合并上清液，加入三氯乙酸溶液B定容；

(3)將步驟(2)獲得的定容上清液中加入活性炭，震蕩后水浴加熱，冷卻至室溫；