[發明專利]一種與綿羊剩余采食量相關的分子標記及其應用

在審

• 申請號: 202110206714.8
• 申請日: 2021-02-24
• 公開（公告）號: CN112921101A
• 公開（公告）日: 2021-06-08
• 發明（設計）人: 汪曉娟;張德印;王維民;李發弟;張小雪;李沖;袁律峰;趙利明;張煜坤
• 申請（專利權）人: 甘肅農業大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 范巍

1.一種檢測分子標記的PCR引物對，其特征在于：該PCR引物對擴增的片段包含有與綿羊剩余采食量相關的分子標記位點，所述分子標記定位于綿羊ME1基因的C/T突變位點。

2.根據權利要求1所述一種檢測分子標記的PCR引物對，其特征在于：所述PCR引物對中，上游引物的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.2所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.3所示。

3.一種檢測分子標記的KASPar引物對，其特征在于：該KASPar引物對擴增的片段包含有與綿羊剩余采食量相關的分子標記位點，所述分子標記定位于綿羊ME1基因的C/T突變位點。

4.根據權利要求3所述一種檢測分子標記的KASPar引物對，其特征在于：所述KASPar引物對中，用于檢測等位基因C的正向引物的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.4所示，用于檢測等位基因T的正向引物的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.5所示，通用反向引物的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.6所示。

5.一種檢測分子標記的試劑盒，其特征在于：該試劑盒包括權利要求1或3所述的引物對，或者包括其他任何可特異性擴增核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示的綿羊ME1基因片段的引物、特異性擴增與該綿羊ME1基因片段同源的含有所述綿羊ME1基因片段所包含的C/T突變位點的其他片段的引物中的任意一種。

6.一種檢測分子標記的方法，其特征在于：包括以下步驟：

1)以綿羊基因組DNA為模板，擴增ME1基因片段；

2)對步驟1)獲得的擴增產物的分子標記位點進行分型鑒定，所述分子標記定位于綿羊ME1基因的C/T突變位點。

7.根據權利要求6所述一種檢測分子標記的方法，其特征在于：具體包括以下步驟：利用權利要求1所述的PCR引物對進行擴增，對擴增產物進行測序和序列分析，得到所述突變位點的堿基類型。

8.根據權利要求6所述一種檢測分子標記的方法，其特征在于：具體包括以下步驟：利用權利要求3所述的KASPar引物對進行PCR擴增，擴增結束后通過熒光信號確定所述突變位點的分型結果。

9.一種與綿羊剩余采食量相關的分子標記在綿羊剩余采食量檢測或綿羊育種中的應用，其特征在于：所述分子標記定位于綿羊ME1基因的C/T突變位點。

10.一種如權利要求1-4中任意一項所述的引物對或權利要求5所述的試劑盒或權利要求6-8中任意一項所述的方法在綿羊剩余采食量檢測或綿羊育種中的應用。