[發明專利]一種花生油體膜蛋白修飾的脂質體及其制備方法

有效

• 申請號: 202110201400.9
• 申請日: 2021-02-23
• 公開（公告）號: CN112957266B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發明（設計）人: 唐文婷;蒲傳奮
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: A61K8/14
• 分類號: A61K8/14;A61K8/49;A61K8/64;A61K8/67;A23L33/105;A23L33/115;A23L33/17;A23P10/35;A61Q19/00
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562
• 代理人: 王穎

本發明公開了一種花生油體膜蛋白修飾的脂質體及其制備方法，屬于保健食品或化妝品加工技術領域。本發明提供一種利用花生油體膜蛋白穩定脂質體的方法，基于天然植物油體蛋白獨特的空間拓撲結構，實現脂質體穩化修飾。其方法是將蛋黃卵磷脂，膽固醇、α?生育酚、吐溫?80、模型載荷分散于無水乙醇，經減壓蒸發除去乙醇以形成薄膜，再將提取的花生油體膜蛋白分散于緩沖液中，經薄膜水化和超聲法制得納米脂質體。花生油體膜蛋白鑲嵌于脂質體中的磷脂雙分子層中，降低了磷脂雙分子層疏水區的流動性，從而提高了脂質體中模型載荷的貯藏保留率。本發明有望實現新型脂質體傳輸載體的穩態化設計，突破脂質體的實際應用瓶頸。

技術領域

本發明涉及保健食品和化妝品加工技術領域，特別是涉及一種花生油體膜蛋白修飾的脂質體及其制備方法。

背景技術

脂質體是由磷脂或其類似物分散于水相，自發形成的具有雙分子層結構的封閉囊泡。其具有天然膜生物的結構、流動性和兩側不對稱性，被廣泛用作活性物質的包埋基質和天然生物膜的模型。脂質體雙分子層可同時包埋親水和疏水性物質，具有較好的生物相容性，無免疫抑制作用，并可定向傳輸至某些器官或組織中，提高被包埋物的有效作用濃度。將脂質體的粒徑控制在納米尺度并對其進行適當修飾，可進一步提高脂質體的生物相容性和體內靶向性。隨著生物技術的快速發展，脂質體的制備技術日趨完善，在食品、化妝品行業也顯示出巨大的應用前景。

用于脂質體構建的磷脂多為天然磷脂或其類似物，在加工及貯藏過程中易氧化水解；作為自組裝包埋傳輸體系，脂質體在使用過程中可能存在顆粒聚集、融合、破裂、易氧化滲漏等問題，在體內也可能存在易被酶水解和巨噬細胞吞噬的問題。因此，由于納米脂質體中的磷脂雙分子層具有一定的流動性且易受環境因素的影響而氧化變質，所以納米脂質體的剛性和穩定性一定程度上限制了其應用范圍。部分輔助膜材的添加能增加其穩定性，但也在一定程度上增大了其組成和結構的多樣性和復雜性。所以如何對脂質體進行修飾，以提高被修飾后的脂質體的結構剛性、貯存穩定性及氧化穩定性性能是目前的主要研究方向。

發明內容

本發明的目的是提供一種花生油體膜蛋白修飾的脂質體及其制備方法，以解決上述現有技術存在的問題。受天然植物油體結構啟發，本發明采用花生油體膜蛋白作為脂質體膜材的組成成分之一。花生油體膜蛋白可鑲嵌于磷脂雙分子層中，降低了磷脂雙分子層疏水區的流動性，從而提高了其結構剛性、貯存穩定性及氧化穩定性。在以芹菜素為模型載荷的花生油體膜蛋白修飾的脂質體中，經180d貯藏后，芹菜素保留率達91.3％，較傳統無修飾脂質體保留率(49.1％)提高85.9％。

為實現上述目的，本發明提供了如下方案：本發明提供一種花生油體膜蛋白修飾的脂質體，所述花生油體膜蛋白鑲嵌于脂質體中的磷脂雙分子層中。

植物油體是由單層磷脂-油體膜蛋白組成的生物膜覆蓋的甘油三酯球形結構，為谷物、油料的貯油亞細胞單元。油體膜蛋白是維持油體在多種環境壓力下穩定性的重要組成成分。油體膜蛋白質主要包括油體蛋白(oleosin)、油體鈣蛋白(caleosin)和油體固醇蛋白(steroleosin)三大類，其中油體蛋白是油體膜蛋白的主要成分。不同來源的油體蛋白結構類似，大都包含三個肽段區域：N-端、中間疏水區和C-端。N-端和C-端位于油體表面，中間疏水區疊貫穿于磷脂單層并嵌入甘油三酯內部，使得油體蛋白能夠牢固地結合在油體表面，貢獻于油體的環境穩定性。

本發明還提供了所述的花生油體膜蛋白修飾的脂質體的制備方法，包括以下步驟；

(1)制備花生油體膜蛋白；

(2)稱取蛋黃卵磷脂、膽固醇、α-生育酚、吐溫-80和模型載荷加入無水乙醇中均勻分散形成溶液A，溶液A減壓旋蒸至形成一層透明脂膜；

(3)將步驟(1)所述花生油體膜蛋白分散于磷酸緩沖液中，

配制成溶液B；

(4)將步驟(3)的溶液B加至步驟(2)所得的透明脂膜中，水化超聲處理即得花生油體膜蛋白修飾的脂質體。