[發明專利]一種花生油體膜蛋白修飾的脂質體及其制備方法有效
| 申請號： | 202110201400.9 | 申請日： | 2021-02-23 |
| 公開（公告）號： | CN112957266B | 公開（公告）日： | 2022-04-08 |
| 發明（設計）人： | 唐文婷;蒲傳奮 | 申請（專利權）人： | 青島農業大學 |
| 主分類號： | A61K8/14 | 分類號： | A61K8/14;A61K8/49;A61K8/64;A61K8/67;A23L33/105;A23L33/115;A23L33/17;A23P10/35;A61Q19/00 |
| 代理公司： | 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 王穎 |
| 地址： | 266109 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 花生油 膜蛋白 修飾 脂質體 及其 制備 方法 | ||
1.一種花生油體膜蛋白修飾的脂質體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟；
（1）制備花生油體膜蛋白；
（2）稱取蛋黃卵磷脂、膽固醇、α-生育酚和吐溫-80加入無水乙醇中，均勻分散形成溶液A，溶液A減壓旋蒸至形成一層透明脂膜；
（3）將步驟（1）所述花生油體膜蛋白分散于磷酸緩沖液中，配制成溶液B；
（4）將步驟（3）的溶液B加至步驟（2）所得的透明脂膜中，水化超聲處理即得花生油體膜蛋白修飾的脂質體；
所述步驟（1）包括以下步驟：
（a）將花生仁放入三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液中浸泡8-12h；
（b）取浸泡后的花生仁放入含有MgCl2的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液中，打漿得到花生勻漿，過濾取濾液，離心，收集乳狀物；
（c）將收集的乳狀物分散于三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液中，離心處理，收集乳狀物，重復此步驟，最終得到乳狀物D；
（d）將步驟（c）最終獲得的乳狀物D分散于正己烷中，冰浴超聲，離心處理，去除有機相，收集沉淀，在保護氣氛下吹干，即得花生油體膜蛋白；
所述三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液濃度為10mM，pH值為7.5；
步驟（2）中所述蛋黃卵磷脂、膽固醇、α-生育酚和吐溫-80的質量比為（6-10）：1：0.2：0.1；所述減壓旋蒸溫度為40-50℃；
步驟（3）中所述磷酸緩沖液濃度為10 mM ，pH值為7.0；所述溶液B中花生油體膜蛋白質量濃度為0.01-0.03%；
步驟（4）所述超聲處理為功率300-500W，處理時間15-20min。
2.根據權利要求1所述的花生油體膜蛋白修飾的脂質體的制備方法，其特征在于，步驟（a）中所述花生仁與所述三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液的料液比為1kg∶10-50L。
3.根據權利要求1所述的花生油體膜蛋白修飾的脂質體的制備方法，其特征在于，步驟（b）中所述三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液中MgCl2的濃度為3mM；所述浸泡后的花生仁與所述含有MgCl2的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液料液比為1kg∶10-50L；
步驟（b）中所述離心處理為溫度4℃，轉速9600rpm離心30min。
4.根據權利要求1所述的花生油體膜蛋白修飾的脂質體的制備方法，其特征在于，步驟（c）中所述離心處理為溫度4℃，轉速9600rpm離心20-30min；所述乳狀物與所述三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液的料液比為1kg∶1-6L。
5.根據權利要求1所述的花生油體膜蛋白修飾的脂質體的制備方法，其特征在于，步驟（d）中所述乳狀物D與所述正己烷的體積比為1∶10；所述離心處理為溫度4℃，轉速10000rpm離心10-20min；所述保護氣氛為氮氣。
6.一種如權利要求1～5任一項所述的制備方法制備的花生油體膜蛋白修飾的脂質體。
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