[發明專利]一種黃顙魚雜交方法及雜交黃顙魚突變體的培育方法

有效

• 申請號: 202110197431.1
• 申請日: 2021-02-22
• 公開（公告）號: CN113142105B
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 冷澤明;龔華祥;張路;董永生;劉國均
• 申請（專利權）人: 眉山市人和漁業專業合作社
• 主分類號: C12N15/89
• 分類號: C12N15/89
• 代理公司: 北京卓特專利代理事務所(普通合伙) 11572
• 代理人: 段旺

本申請提供一種黃顙魚雜交方法及雜交黃顙魚突變體的培育方法。其中，黃顙魚雜交方法包括：S11、親魚選擇；S12、親魚培育；S13、親魚管理；S14、人工催產；S15、人工授精；S16、孵化管理。本申請提供的黃顙魚雜交方法，能夠大大提升黃顙魚雜交的成功率，提高雜交黃顙魚的質量，為雜交黃顙魚的繼續繁衍、突變研究等打下堅實的基礎。本申請提供的雜交黃顙魚突變體的培育方法能夠顯著的抑制雜交黃顙魚體內mstn的功能，改善雜交黃顙魚的肌肉質量，進一步促進雜交黃顙魚的生長。

技術領域

本申請涉及生物技術領域，特別涉及一種黃顙魚雜交方法及雜交黃顙魚突變體的培育方法。

背景技術

黃顙魚是鲿科、黃顙魚屬一種常見的淡水魚。黃顙魚屬小型魚類，生長較慢，黃顙魚0⁺-2⁺齡為性成熟前的旺盛生長階段，平均增長率較高。特別是1⁺齡階段生長最快，一般至1⁺齡大部分性成熟，2⁺齡全部性成熟，3⁺齡以后體長相對增長率遞減明顯，但由于性腺的發育，體重相對增長率遞減緩緩慢。

雜交黃顙魚相對于普通黃顙魚長速較快、體型修長、抗逆性強、耐運輸、易存養，越來越受到人們的青睞，但是目前的雜交方法成功率低，成本高，不適于大規模的推廣應用。并且，得到的雜交黃顙魚肉質較差，亟待改良。

肌肉生長抑制素(mstn)是轉化生長因子β超家族成員之一，是哺乳動物骨骼肌生長發育的負調控因子。經實驗證明，mstn基因敲除的小鼠，其骨骼肌重量明顯增加，是正常普通小鼠的2-3倍左右。mstn包含N端的前肽和C端的成熟肽，在動物體內前肽可以和成熟肽發生二聚體結合，從而抑制mstn的功能，促進動物的生長。

對于黃顙魚，特別是雜交黃顙魚而言，針對其mstn基因突變的研究十分稀少，目前，現有技術是通過直接敲除雜交黃顙魚的mstn基因組DNA片段來達到抑制mstn功能、促進雜交黃顙魚生長的目的，但實驗研究證明，mstn基因組DNA片段中部分片段可能會對于雜交黃顙魚的生長具有積極作用，發明人針對于此展開了系列研究。

發明內容

有鑒于此，本申請實施例提供了一種黃顙魚雜交方法及雜交黃顙魚突變體的培育方法，以解決現有技術中存在的技術缺陷。

本申請的一個發明點為提供一種黃顙魚雜交方法，該方法包括：

S11、親魚選擇：選擇體質健壯、無病無傷的雌魚和雄魚，雌魚尾重100-150g，雄魚尾重400g-450g；

S12、親魚培育：將雌魚和雄魚分養在溶解氧的培育池中，投喂親魚飼料；

S13、親魚管理：產卵前一個月，每隔5-6天沖水一次，且每半個月檢測水質常規指標，確保氨氮低于0.05mg/L，亞硝酸鹽保持低于0.015mg/L；

S14、人工催產：配制催產注射液，并在親魚的鰭基部注射兩次；

S15、人工授精：按雌雄比例1000:1-1.5配組，取出雄魚精巢，吸干精巢上的血液和水分后，放入研缽中用剪刀剪碎后研碎，加入20倍體積的精子保存液保存備用；然后擠出雌魚魚卵流入瓷盆內，隨即加入精液，攪拌，再加入0.3％-0.5％的氯化鈉溶液，迅速不停地攪拌激活受精；最后用黃泥漿水脫粘，并將受精卵放入孵化桶內流水孵化，密度為30-50萬粒/m³；

S16、孵化管理：調節水流以適應受精卵的發育，出膜平游后下魚苗至暫養池，待魚苗體色全黑并開始分散時，計數后使用高聚乙烯氧氣袋打包后下塘培育，獲得雜交黃顙魚。

進一步地，所述雌魚為雌黃顙魚/江黃顙魚，所述雄魚為雄瓦氏黃顙魚。

進一步地，所述S12，包括：