[發明專利]基于環介導等溫擴增技術鑒定大青褶傘的引物組、試劑盒和方法

在審

• 申請號: 202110190526.0
• 申請日: 2021-02-18
• 公開（公告）號: CN112852992A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 陳愛亮;王楠;高潔;張娟;謝瑞彬;于文杰
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 余菲

1.一種基于環介導等溫擴增技術鑒定大青褶傘的引物組，其特征在于，所述引物組包括：外引物對、內引物對以及環引物；其中，所述外引物對包括核酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4的引物，所述內引物對包括核酸序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3的引物，所述環引物的核酸序列如SEQ ID NO.5所示。

2.權利要求1所述的引物組在鑒定大青褶傘中的應用。

3.一種鑒定大青褶傘的試劑盒，其特征在于，其包括權利要求1所述的引物組。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括LAMP反應液；所述LAMP反應液含有：0.58-0.62μM所述外引物對、4.6-5.0μM所述內引物對和1.8-2.2μM所述環引物。

5.一種基于環介導等溫擴增技術鑒定大青褶傘的方法，其特征在于，其包括：將提取自待測樣品的核酸模板與權利要求1所述的引物組混合，進行LAMP反應。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，進行LAMP反應的反應體系中，所述外引物對的濃度為0.58-0.62μM；所述內引物對的濃度為4.6-5.0μM；所述環引物的濃度為1.8-2.2μM。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，進行LAMP反應的反應體系中含有酚紅染料和Bst DNA聚合酶。

8.根據權利要求5-7任一項所述的方法，其特征在于，進行LAMP反應的反應溫度為61-65℃。

9.根據權利要求5-7任一項所述的方法，其特征在于，所述待測樣品為蘑菇、嘔吐物或糞便。

10.根據權利要求5-7任一項所述的方法，其特征在于，所述核酸模板為基因組DNA。