[發(fā)明專利]一種培養(yǎng)犬瘟熱病毒和犬細(xì)小病毒的方法及應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110190109.6 | 申請日： | 2021-02-18 |
| 公開（公告）號： | CN112795530A | 公開（公告）日： | 2021-05-14 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 范金秀;徐高原;蔡潮;焦利紅;韋陽飛;謝月嬌;劉新穎;明靜芳;陳亮;陳關(guān)平;韓進(jìn);洪燈 | 申請（專利權(quán)）人： | 武漢科前生物股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071;C12N7/00;C12N7/02 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002 | 代理人： | 錢云 |
| 地址： | 430206 湖北省武*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 培養(yǎng) 犬瘟熱 病毒 細(xì)小 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種培養(yǎng)犬瘟熱病毒和犬細(xì)小病毒的方法，其特征在于，包括：
以Vero細(xì)胞作為犬瘟熱病毒的宿主，以F81細(xì)胞作為犬細(xì)小病毒的宿主，通過生物反應(yīng)器進(jìn)行培養(yǎng)；
所述生物反應(yīng)器中載體為片狀載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述片狀載體為聚酯纖維片狀載體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述生物反應(yīng)器為固定床籃式攪拌槳反應(yīng)器。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述Vero細(xì)胞在進(jìn)行培養(yǎng)前的接種密度為4-5×105cell/mL；和/或，
所述F81細(xì)胞在進(jìn)行培養(yǎng)前的接種密度為3-4×105cell/mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述Vero細(xì)胞和所述F81細(xì)胞在培養(yǎng)時用的培養(yǎng)基均為包含1.8％～2.2％新生牛血清的199培養(yǎng)基，pH為7.0～7.2。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述Vero細(xì)胞的培養(yǎng)條件為：
培養(yǎng)溫度35～35.5℃，pH為7.0-7.2，攪拌轉(zhuǎn)速為45-55rpm，溶氧為40-50％；和/或，
所述F81細(xì)胞的培養(yǎng)條件為：
培養(yǎng)溫度37～37.5℃，pH為7.0-7.2，攪拌轉(zhuǎn)速為45-55rpm，溶氧為40-50％。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述犬瘟熱病毒的接種量為0.01～0.02MOI；和/或，所述犬細(xì)小病毒的接種量為0.04～0.06MOI。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述犬瘟熱病毒在培養(yǎng)72～84h后收獲；和/或，所述犬細(xì)小病毒在培養(yǎng)144～156h后收獲。
9.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的方法在制備用于免疫犬瘟熱病毒或犬細(xì)小病毒的藥物中的應(yīng)用。
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