[發(fā)明專利]一種從藍(lán)莓花青素提取物中制備5種花色苷標(biāo)準(zhǔn)品的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110187597.5
• 申請日: 2021-02-18
• 公開（公告）號: CN112964804B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 徐青;周元敬;龍尚俊;聶飛;顏昌銳;楊江;周友松
• 申請（專利權(quán)）人: 貴州省生物研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/08;G01N30/14;G01N30/34
• 代理公司: 貴州派騰知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 52114
• 代理人: 谷慶紅

1.一種從藍(lán)莓花青素提取物中制備5種花色苷標(biāo)準(zhǔn)品的方法，其特征在于，將含有5種花色苷成分的藍(lán)莓花青素待制溶液經(jīng)有機濾膜處理后，進(jìn)入半制備高效液相色譜處理，制得5種花色苷標(biāo)準(zhǔn)品；色譜柱條件為：制備柱：C18；流速：4mL/min；檢測波長：520nm；檢測溫度：25℃；檢測時間：80min；流動相：水相B為0.1%三氟乙酸水溶液，有機相A為乙腈；梯度洗脫；

所述梯度洗脫的條件為：0~19min?91%B?9%A；20~29min?90%B?10%A；30~39min?89%B11%A；40~49min?87%B?13%A；50~59min?86%B?14%A；60~69min?85%B?15%A；70~77min?80%B20%A；78min?91%B?9%A；

所述5種花色苷是指飛燕草素-3-O-葡萄糖苷、矢車菊素-3-O-葡萄糖苷、矮牽牛花素-3-O-葡萄糖苷、芍藥色素-3-O-葡萄糖苷、錦葵色素-3-O-葡萄糖苷；

所述藍(lán)莓花青素提取物是按照以下技術(shù)制成：藍(lán)莓鮮果中投入0.3%量的復(fù)合酶，復(fù)合酶由纖維素酶和果膠酶按2:1的質(zhì)量比組成，37℃下避光酶解4小時；然后再加入含1%檸檬酸的75%乙醇提取6小時，過濾得到濾液和濾渣；濾渣再加入含1%檸檬酸的75%乙醇提取6小時，重復(fù)2次；合并三次的濾液，減壓濃縮至一半的體積，加入2倍體積的乙酸乙酯萃取3次；合并下層，減壓濃縮后，通過D101大孔吸附樹脂進(jìn)行花青素的富集，經(jīng)30~50%的乙醇洗脫，冷凍干燥處理，獲得藍(lán)莓花青素提取物。

2.如權(quán)利要求1所述的從藍(lán)莓花青素提取物中制備5種花色苷標(biāo)準(zhǔn)品的方法，其特征在于，所述C18柱為Venusil?MP?C18，規(guī)格為?5μm?100??10×250mm。

3.如權(quán)利要求1所述的從藍(lán)莓花青素提取物中制備5種花色苷標(biāo)準(zhǔn)品的方法，其特征在于，所述藍(lán)莓花青素待制溶液是將藍(lán)莓花青素提取物溶于甲醇水溶液制成，甲醇水溶液中甲醇的含量為0~50w%。

4.如權(quán)利要求3所述的從藍(lán)莓花青素提取物中制備5種花色苷標(biāo)準(zhǔn)品的方法，其特征在于，所述藍(lán)莓花青素待制溶液中藍(lán)莓花青素提取物的濃度為1mg/ml-50mg/ml。

5.如權(quán)利要求1所述的從藍(lán)莓花青素提取物中制備5種花色苷標(biāo)準(zhǔn)品的方法，其特征在于，所述藍(lán)莓花青素待制溶液的上樣量為1mg-10000mg。

6.如權(quán)利要求1所述的從藍(lán)莓花青素提取物中制備5種花色苷標(biāo)準(zhǔn)品的方法，其特征在于，所述有機濾膜的孔徑為0.22μm。