[發明專利]連接核酸與蛋白或肽的方法在審
| 申請號： | 202110186703.8 | 申請日： | 2021-02-09 |
| 公開（公告）號： | CN112851771A | 公開（公告）日： | 2021-05-28 |
| 發明（設計）人： | 門冬;張先恩;周昆;曹姍姍;周娟 | 申請（專利權）人： | 中國科學院武漢病毒研究所 |
| 主分類號： | C07K14/315 | 分類號： | C07K14/315;C07K14/435;C12N9/90;C12N9/02;C12N9/10;A61K47/42;A61K47/54 |
| 代理公司： | 北京布瑞知識產權代理有限公司 11505 | 代理人： | 孟潭 |
| 地址： | 430071 湖北省武*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 連接 核酸 蛋白 方法 | ||
1.一種連接核酸與蛋白或肽的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)目標蛋白或肽與DNA拓撲異構酶形成融合蛋白；
(2)融合蛋白中的DNA拓撲異構酶催化共價連接目標核酸。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述目標蛋白或肽與DNA拓撲異構酶直接連接或通過柔性連接肽連接；更優選通過柔性連接肽連接。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述DNA拓撲異構酶選自Type I拓撲異構酶中的topoI、topoIII、topo V、Reverse gyrase；
和/或；
所述DNA拓撲異構酶選自Type II拓撲異構酶中的TopoII、Topo VI、topoIV、DNA旋轉酶。
4.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述DNA拓撲異構酶選自Type I中的IB亞型，優選topoI。
5.根據權利要求4所述方法，其特征在于，所述topoI識別的核酸序列為5’-n-CCCTT-n-3’，其中n代表零個、一個或多個堿基；優選地，所述n為0-30個堿基；
優選地，所述topoI的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示或其同源序列。
6.一種蛋白核酸復合物，其特征在于，采用權利要求1-5任一項所述的方法獲得。
7.DNA拓撲異構酶在目標蛋白或肽與目標核酸連接中的用途。
8.根據權利要求7所述的用途，其特征在于，所述DNA拓撲異構酶選自Type I拓撲異構酶中的topoI、topoIII、topo V、Reverse gyrase，和/或；
所述DNA拓撲異構酶選自Type II拓撲異構酶中的TopoII、Topo VI、topoIV、DNA旋轉酶；
優選地，所述DNA拓撲異構酶選自Type I中的IB亞型，優選topoI。
9.一種融合蛋白，所述融合蛋白包括目標蛋白或肽和DNA拓撲異構酶。
10.根據權利要求9所述的融合蛋白，其特征在于，所述目標蛋白或肽與所述DNA拓撲異構酶直接連接或通過柔性連接肽連接；更優選通過柔性連接肽連接；
優選地，所述DNA拓撲異構酶選自Type I中的IB亞型，優選topoI。
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