[發明專利]一個兼抗黃瓜花葉病毒和馬鈴薯Y病毒的雙價弱毒疫苗有效
| 申請號： | 202110185710.6 | 申請日： | 2021-02-11 |
| 公開（公告）號： | CN112961839B | 公開（公告）日： | 2023-05-19 |
| 發明（設計）人： | 原雪峰;劉珊珊;葛玉倩;于成明 | 申請（專利權）人： | 山東農業大學 |
| 主分類號： | C12N7/01 | 分類號： | C12N7/01;C12N7/04;C12N15/84;C12N15/66;A01N63/40;A01N63/60;A01P1/00;C12R1/94 |
| 代理公司： | 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240 | 代理人： | 薛鵬喜 |
| 地址： | 271018 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一個 黃瓜花葉病毒 馬鈴薯 病毒 雙價弱毒 疫苗 | ||
【權利要求書】：
1.兼抗黃瓜花葉病毒和馬鈴薯Y病毒的雙價弱毒疫苗在交叉保護防治黃瓜花葉病毒和馬鈴薯Y病毒共同侵染中的應用；
所述雙價弱毒疫苗含有CMVFny分離物的突變型RNA2；所述CMVFny分離物的突變型RNA2是在CMVFny分離物的RNA2全長序列第2661位之后插入TAATAG以及一段馬鈴薯Y病毒的保守序列；所插入的馬鈴薯Y病毒的保守序列的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示；所述CMVFny分離物的突變型RNA2的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示；
所述的兼抗黃瓜花葉病毒和馬鈴薯Y病毒的雙價弱毒疫苗由如下方法構建而成：
(1)以CMVFny?RNA2侵染性克隆質粒pCB301-CMVFny-R2為模板，利用反向PCR擴增技術獲得中間載體pCCFR2-2bPTⅡ；所述中間載體pCCFR2-2bPTⅡ是2661位插入TAATAG，然后再依次引入BamH?I、SpeI和Sma?I酶切位點；
(2)利用酶切和連接方法將SEQ?ID?NO.1所示的馬鈴薯Y病毒的保守序列插入到中間載體pCCFR2-2bPTⅡ中，即構建得到兼抗黃瓜花葉病毒和馬鈴薯Y病毒的雙價突變型質粒載體pCCFR2-2bPTⅡ-PY2810-3009。
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