[發明專利]一種連翹葉中提取連翹苷的方法

有效

• 申請號: 202110183230.6
• 申請日: 2021-02-08
• 公開（公告）號: CN112834651B
• 公開（公告）日: 2023-06-30
• 發明（設計）人: 王少康;王靜
• 申請（專利權）人: 東南大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京同輝知識產權代理事務所(普通合伙) 11357
• 代理人: 饒富春

1.一種連翹葉中提取連翹苷的方法，其特征在于，連翹葉采用水提取，先采用單因素試驗分別考察加水量、提取溫度、提取次數和提取時間對連翹苷得率的影響，再采用L₉(3⁴)正交實驗法確定連翹葉中連翹苷的最佳提取工藝，提取方法包括：

S1、色譜條件的確定；

所述色譜條件中流動相乙腈與水的體積配比為21：79；流速為0.8mL﹒min^-1，檢測波長為277nm，柱溫為室溫，進樣量10μL，進樣三次取平均值；

S2、對照品溶液標準曲線的繪制；

S2S1、稱取干燥至恒重的連翹苷對照品5.00mg，置于50mL容量瓶中；

S2S2、加50mL甲醇溶解定容，搖勻，進樣前過濾，過濾采用0.22μm有機濾膜；

S2S3、吸取對照品溶液0.2mL，0.4mL，0.5mL，0.8mL，1mL，2mL，5mL，10mL，置于10mL容量瓶中，定容，搖勻；

S2S4、根據連翹苷對照品濃度和峰面積繪制標準曲線，得到對照品溶液的濃度范圍；

S3、單因素試驗制備樣品溶液

S3S1、將連翹葉粉碎，過目篩；

S3S2、稱取連翹葉粉末10g，加20倍體積水，80℃煮40min，過濾，過濾采用三層紗布并過濾兩次；

S3S3、將濾液混合濃縮至100mL，取10mL提取液置于50mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度線，搖勻，作為樣品溶液備用；

S3S4、在其他條件相同時，分別選取加水量、提取溫度、提取次數和提取時間4個因素進行單因素試驗；

S4、在單因素試驗的基礎上，選擇加水量、提取溫度、提取次數、提取時間4個因素作為考察因素，每個因素設3個水平，用L₉(3⁴)正交表進行試驗，以確定最佳工藝條件；

S5、精確稱取9份各10g的連翹葉粉末，按照正交表的條件進行提取，以連翹苷的含量為考察指標進行比較，確定最佳提取條件；

所述步驟S3S4中不同加水量的提取試驗步驟：

(1)稱取連翹葉粉末，設置加水量梯度，在80℃下提取2次，每次提取60min；

(2)將樣品溶液蒸發濃縮至50mL,取10mL樣品溶液用甲醇定容至50mL容量瓶中，搖勻；

(3)在步驟S1色譜條件下檢測其峰面積，計算其濃度；

所述步驟S3S4中不同溫度提取試驗步驟：

(1)精密稱取5份10g連翹葉粉末，分別加入150mL水，在60，70，80，90，100℃下提取2次，每次提取60min；

(2)將5份樣品溶液蒸發濃縮至50mL,取10mL樣品溶液用甲醇定容至50mL容量瓶中，搖勻；

(3)在步驟S1色譜條件下檢測其峰面積，計算其濃度；

步驟S3S4中不同次數提取試驗步驟：

(1)精密稱取5份10g連翹葉粉末，分別加入150mL水，在80℃下分別提取1，2，3，4，5次，每次60min；

(2)將5份樣品溶液蒸發濃縮至50mL,取10mL樣品溶液用甲醇定容至50mL容量瓶中，搖勻；

(3)在步驟S1色譜條件下檢測其峰面積，計算其濃度；

所述步驟S3S4中不同時間提取試驗步驟：

(1)精密稱取5份10g連翹葉粉末，分別加入150mL水，在80℃下提取2次，時間分別為20，30，40，50，60min；

(2)將5份樣品溶液蒸發濃縮至50mL,取10mL樣品溶液用甲醇定容至50mL容量瓶中，搖勻；

(3)在步驟S1中的色譜條件下檢測其峰面積，計算其濃度。