[發明專利]一種腸粘膜炎動物模型的構建方法

有效

• 申請號: 202110175422.2
• 申請日: 2021-02-06
• 公開（公告）號: CN112970670B
• 公開（公告）日: 2022-08-05
• 發明（設計）人: 段繼峰;戴飛紅;俞誠;楊平
• 申請（專利權）人: 澎立生物醫藥技術（上海）股份有限公司
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 北京天盾知識產權代理有限公司 11421
• 代理人: 宋凌林

1.一種腸粘膜炎動物模型的構建方法，其特征在于，

所述構建方法包括：

對動物樣品的腸道進行大腸桿菌接種以誘導動物樣品腸道產生炎癥，

對接種后的動物樣品進行性狀觀察、生理生化指標檢測和接種腸道的粘膜組織結構顯微觀察，

當動物樣品出現血便或粘液便、與炎癥因子相關的生理生化指標上升或接種腸道粘膜組織皮損或炎癥浸潤的癥狀時，判斷所述腸粘膜炎動物模型構建成功；

所述腸道菌群接種能夠是對動物樣品的直腸中段進行菌液膠囊或菌液貼片的施用，通過采用保存有混合或單一株系且濃度和體積定量的菌液的菌液膠囊或菌液貼片通過菌液施用裝置遞送至動物樣品的直腸中段預設位置，使菌液膠囊或菌液貼片持續在預設位置進行菌液釋放實現細菌接種；

所述菌液膠囊或菌液貼片通過菌液施用裝置被放置腸道內部，所述菌液施用裝置包含固定單元（100）、連接桿（200）和握把（300），其中，

固定單元（100），與所述連接桿（200）一側連接，其包含用于夾持或連接菌液膠囊或菌液貼片的固定組件（110）和能夠撐開腸道的外輪廓（120），所述外輪廓（120）按照能夠在菌液施用裝置退出和進入腸道時能夠自小向大的趨勢進行固定單元（100）的退出的方式設置為兩端寬度小于中間寬度；

連接桿（200），用于連接所述固定單元（100）和所述握把（300）的柔性細桿，其設置有能夠探測所述固定單元（100）進入腸道內部深度的長度計量組件并設置有在進入不同動物腸道時用于提示使用者菌液膠囊或菌液貼片到達預設施用位置的接種提示標識；

握把（300），相對所述固定單元（100）一側與所述連接桿（200）連接，設置有控制所述固定組件（110）工作狀態的開關，用于為使用者提供操作區域和控制所述固定組件（110）工作狀態的區域。

2.根據權利要求1所述的動物模型的構建方法，其特征在于，所述膠囊是通過緩釋膜多層隔離和包裹菌液的菌液膠囊，其在腸道內通過腸道的體液對每一層緩釋膜的銷蝕達到預設時間內不間斷對腸道進行小劑量菌群液體的施用。

3.根據權利要求2所述的動物模型的構建方法，其特征在于，所述菌液膠囊按照能夠被腸道包裹以卡合固定于腸道內部的方式設置有允許單個細菌穿透的滲透膜，所述滲透膜以密封包裹菌液的方式使膠囊成為具有弧形的可吸收單元，所述膠囊通過所述滲透膜的允許單體細菌穿透的孔道直徑設置形成對細菌個體的控釋。

4.根據權利要求3所述的動物模型的構建方法，其特征在于，所述菌液膠囊能夠通過腸道的包裹作用卡合預設施用位置，并通過腸道的蠕動壓力或腸道內部體液的作用幫助菌液膠囊內部的細菌通過所述滲透膜的孔徑進入腸道或通過滲透膜被降解釋放細菌至腸道。

5.根據權利要求4所述的動物模型的構建方法，其特征在于，所述菌液貼片按照能夠吸附并保存菌液的方式設置有吸附層和粘貼層，所述吸附層按照能夠在收到擠壓時使體內菌液脫出其內部孔徑的方式設置于所述粘貼層一側，所述粘貼層能夠是一種允許細菌穿過的可降解粘合層，其通過與腸道的粘合作用使菌液貼片與腸道內壁連接，并基于體液對粘貼層的降解作用在預設時間段內勻速降解直至消失，所述吸附層于腸道內壁脫落。

6.根據權利要求5所述的動物模型的構建方法，其特征在于，所述菌液膠囊還能夠是緩釋制劑，其按照使活性菌液與低粘度親水性聚合物混合形成中心緩釋層，活性菌液和高粘度親水性聚合物混合形成外緩釋層的方式按照由內向外的順序設置有中心緩釋層、隔離層、外緩釋層和包衣，所述包衣能夠在接觸體液后一定時間內降解以暴露所述外緩釋層，所述外緩釋層在施用預設時間后暴露所述隔離層，所述隔離層在預設時間內降解暴露所述中心緩釋層，通過多層壓制形成的緩釋膠囊實現菌液的持續施用。

7.根據權利要求6所述的動物模型的構建方法，其特征在于，所述固定單元（100）表面設置有片狀吸液材料的潤滑面，所述潤滑面能夠通過設置的吸液層在固定單元（100）進入腸道受到擠壓時排出潤滑液體，以此減少菌液施用裝置與腸道內壁的摩擦。

8.根據權利要求7所述的動物模型的構建方法，其特征在于，所述外輪廓（120）按照能夠在空間坐標軸x、y、z中任意兩個方向設置有至少兩條支撐框的方式形成包裹固定組件（110）的立體結構，所述立體結構基于兩端窄于中間的弧形使固定單元（100）能夠自小到大緩慢進入腸道，避免腸道損傷。