[發明專利]一種用于檢測HLA-B*58:01基因的試劑盒及其方法

有效

• 申請號: 202110166818.0
• 申請日: 2021-02-05
• 公開（公告）號: CN112746095B
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 為朔醫學數據科技（北京）有限公司
• 主分類號: C12Q1/6858
• 分類號: C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 陳秋夢

本發明公開了一種用于檢測HLA?B*58:01基因的試劑盒及其方法，涉及基因檢測技術領域，該試劑盒包括核酸組合1；所述核酸組合1包括核苷酸序列如SEQ ID No.1～2所示的第一引物對。該引物對是針對HLA?B*58:01基因的特異性位點、區域進行設計的，單個反應即可完成HLA?B*58:01基因的有效檢測，且檢測的準確性高，大幅度降低了假陰性和假陽性結果的出現。

技術領域

本發明涉及基因檢測技術領域，具體而言，涉及一種用于檢測HLA-B*58:01基因的試劑盒及其方法。

背景技術

主要組織相容性復合體(Major Histocompatibility Complex，MHC)是一組編碼動物主要組織相容性抗原的基因群的統稱，人類的MHC被稱為人類白細胞抗原(HumanLeukocyte Antigen，HLA)。HLA基因定位于人類第6號染色體短臂上，由一群密切連鎖的復等位基因組成，包含約360萬個堿基對，長約4MB，是當前已知的人類染色體中基因密度最高、多態性最為豐富的區域。HLA是細胞表面分子，主要參與T細胞活化的已加工過的抗原肽的呈遞并在其中起重要作用，構成機體最重要的免疫系統之一。

HLA包含HLA-I、HLA-II和HLA-III，也稱作MHC-I、MHC-II和MHC-III。HLA-I主要包括HLA-A、HLA-B、HLA-C，位于HLA復合體遠離著絲粒的一端；HLA-II主要包括HLA-DR、HLA-DQ及HLA-DP，位于HLA復合體近著絲粒的一端；III類基因區位于二者之間。世界衛生組織HLA因子命名委員會命名的相關HLA等位基因已達到28000多個(2020.12)，在HLA-I和HLA-II等位基因家族中HLA-B的多態性最顯著。HLA基因復合體不僅是多基因的而且是多等位基因的，HLA基因的多態性決定了在個體間可以產生高度多樣化的HLA蛋白，也決定了不同個體處理和呈遞同一種抗原的能力不同，從遺傳水平上調控免疫應答功能，從而使不同個體對同一種抗原的免疫應答可表現出個體差異。這種個體差異或產生保護性免疫，或形成免疫耐受，或出現自身免疫傾向，或表現為HLA相關疾病。

藥物不良反應(Adverse Drug Reaction，ADR)己經成為許多國家重要的致病甚至致死原因，皮膚不良反應是藥物不良反應中的重要一部分，約占藥物不良反應的三分之一。皮膚不良反應在臨床上最常見的主要包括輕度的斑丘疹(MPE)、Stevens-Johnson綜合征(SJS)、中毒性表皮壞死松懈癥(TEN)。其中SJS和TEN是嚴重的皮膚和黏膜反應，可導致永久性殘疾甚至致命，SJS致死率約為5％，TEN致死率則高達25～50％。皮膚不良反應大部分患者主要和以下這些藥物相關：別嘌呤醇(Allopurinol)、卡馬西平(Carbamazepine)、奧卡西平(Oxcarbazepine)、苯妥英(Phenytoin)、拉莫三嗪(Lamotrigine)、苯巴比妥(Phenobarbital)以及磺胺類抗菌素等。

研究表明，中國大陸高尿酸血癥的患病率13.3％，患病人數已經超過1.2億；中國大陸痛風的患病率為1.1％，患病人數已經超過1700萬。別嘌呤醇(Allopurinol)為次黃嘌呤的異構體，是黃嘌呤氧化酶的抑制劑，主要用于阻止次黃嘌呤和黃嘌呤代謝為尿酸，從而減少尿酸的生成，是高尿酸血癥和痛風患者降尿酸治療的一線用藥。

別嘌呤醇療效顯著、價格低廉，但在中國人群中使用時易發生別嘌醇超敏反應，研究表明中國臺灣地區超敏反應發生率為2.7％，別嘌醇超敏反應一旦發生，致死率高達30％。研究表明，別嘌呤醇不良反應的發生與HLA-B*58:01存在明顯相關性，而漢族人群攜帶HLA-B*58:01基因型的頻率為10％～20％。HLA-B*58:01等位基因與別嘌呤醇引發的SJS或TEN的強相關性在中國(包括臺灣和香港地區)、泰國、新加坡、韓國等國家地區的多個研究小組的漢族人群中得到證實。幾乎所有副反應的患者都是HLA-B*58:01的攜帶者，而別嘌呤醇耐受者中只有15％左右的HLA-B*58:01攜帶者。國內外相關指南均指出，亞裔人群在使用別嘌呤醇之前應進行HLA-B*58:01基因檢測，對于HLA-B*58:01陽性患者，均不推薦使用別嘌呤醇。