[發明專利]一種用于檢測HLA-B*58:01基因的試劑盒及其方法

有效

• 申請號: 202110166818.0
• 申請日: 2021-02-05
• 公開（公告）號: CN112746095B
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 為朔醫學數據科技（北京）有限公司
• 主分類號: C12Q1/6858
• 分類號: C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 陳秋夢

1.一種用于檢測HLA-B*58:01基因的試劑盒，其特征在于，其包括核酸組合1；

所述核酸組合1由核苷酸序列如SEQ ID No.1~2所示的第一引物對和核苷酸序列如SEQID No.3所示的第一探針組成。

2.根據權利要求1所述的用于檢測HLA-B*58:01基因的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括用于檢測內參基因的核酸組合2；

所述核酸組合2由核苷酸序列如SEQ ID No.4~5所示的第二引物對和核苷酸序列如SEQID No.6所示探針2組成。

3.根據權利要求1~2任一項所述的用于檢測HLA-B*58:01基因的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括PCR反應液。

4.根據權利要求1~2任一項所述的用于檢測HLA-B*58:01基因的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括預處理試劑A和預處理試劑B；

所述預處理試劑A包括：蔗糖、Tris-HCl、MgCl₂、Triton-X-100和水；

所述預處理試劑B包括：NaCl、Tris-HCL、NaOH、EDTA、SDS和水。

5.一種用于檢測HLA-B*58:01基因的方法，其特征在于，所述方法包括采用如權利要求1~4任一項所述的用于檢測HLA-B*58:01基因的試劑盒對待測樣本進行qPCR檢測；

所述方法不以疾病的診斷或檢測為直接目的。

6.根據權利要求5所述的用于檢測HLA-B*58:01基因的方法，其特征在于，所述待測樣本為血液樣本。

7.根據權利要求6所述的用于檢測HLA-B*58:01基因的方法，其特征在于，在進行所述qPCR之前，所述方法包括：將所述血液樣本與預處理試劑A混合，對混合產物進行離心，將去除上清液后的離心產物與預處理試劑B混合；

所述預處理試劑A包括：蔗糖、Tris-HCl、MgCl₂、Triton-X-100和水；

所述預處理試劑B包括：NaCl、Tris-HCL、NaOH、EDTA、SDS和水。

8.根據權利要求7所述的用于檢測HLA-B*58:01基因的方法，其特征在于，在所述血液樣本與所述預處理試劑A混合后的溶液中，所述蔗糖的終濃度為200~400 mM，所述Tris-HCl的終濃度為1~20 mM，所述MgCl₂的終濃度為1~10 mM，所述Triton-X-100的終濃度為1%~5%；

離心產物與預處理試劑B混合的溶液中，所述NaCl的終濃度為80~120 mM，所述Tris-HCL的終濃度為30~70 mM，所述NaOH的終濃度為30~70 mM，所述EDTA的終濃度為0.1~10 mM，所述SDS的終濃度為0.001~0.05%；

所述離心的轉速為8000~12000 rpm，時間為0.5~3 min。