[發(fā)明專利]一種涎液化糖鏈抗原磁微粒化學(xué)發(fā)光檢測用試劑或試劑盒及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110165268.0
• 申請日: 2021-02-06
• 公開（公告）號: CN112946255A
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉健;沈林;陳汝彬;靳啟航
• 申請（專利權(quán)）人: 湖南永和陽光生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/68;G01N21/76
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 薛紅凡

本發(fā)明提供了一種涎液化糖鏈抗原磁微粒化學(xué)發(fā)光檢測用試劑或試劑盒及其應(yīng)用，屬于體外診斷試劑技術(shù)領(lǐng)域。所述試劑包括由2～8μg/ml磁微粒標(biāo)記KL?6抗體1、20％～30％初生牛血清、0.01％～0.1％防腐劑、20％～30％甘油、0.01％～0.1％吐溫20、0.1％～1％BSA和50％～70％PBS緩沖液組成的磁微粒試劑和6～10μg/ml吖啶酯標(biāo)記KL?6抗體2、10％～40％的甘油、0.5％～5％的BSA和60％～90％PBS緩沖液組成的吖啶酯試劑。KL?6檢測試劑盒具有靈敏度高、精密度好、準(zhǔn)確度高的特點，有優(yōu)秀抗干擾能力，且在40000IU/mL高濃度樣本下未出現(xiàn)明顯的HOOK效應(yīng)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于體外診斷試劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種涎液化糖鏈抗原磁微粒化學(xué)發(fā)光檢測用試劑或試劑盒及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

Kohno于1985年發(fā)現(xiàn)，利用人肺腺癌細(xì)胞系(VMRC-LCR)免疫小鼠制備了多株單克隆抗體，將其中的第6號抗體識別的涎液化糖鏈抗原命名為KL-6。KL-6屬于分類為Cluster9的上皮性粘蛋白1(MUC1)，表達(dá)于Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞表面，在正常肺組織和終末細(xì)支氣管上皮細(xì)胞只有極少量表達(dá)，在退變的Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞表達(dá)增強。

KL-6對判斷Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞的功能具有特異性。若肺部基底膜的損害，可致血管通透性增加，使KL-6入血。血清KL-6可反映肺泡損傷，II型肺泡細(xì)胞再生和多種間質(zhì)性肺疾病的活動度。KL-6水平能敏感地反映肺泡上皮和間質(zhì)的損傷程度。近年來多項研究報道，KL-6高水平表達(dá)可能與間質(zhì)性肺疾病(ILD)、急性肺損傷、放射性肺炎、病毒性肺炎、藥物相關(guān)性間質(zhì)性肺炎、腫瘤等疾病相關(guān)聯(lián)，其作用可能是促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖和遷徙，從而影響纖維化的發(fā)生和發(fā)展。

目前，臨床或?qū)嶒炇覍τ贙L-6檢測的方法有免疫比濁法和酶促化學(xué)發(fā)光法。免疫比濁有檢測靈敏度低、高濃度樣本容易發(fā)生HOOK效應(yīng)等缺陷，而酶促化學(xué)發(fā)光法雖解決了靈敏度問題，但反應(yīng)時間較長，需要開放一種反應(yīng)時間短的快速檢驗方法來測定KL-6。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種涎液化糖鏈抗原磁微粒化學(xué)發(fā)光檢測用試劑，以化學(xué)發(fā)光效率較高的吖啶酯為化學(xué)發(fā)光試劑實現(xiàn)快速檢測涎液化糖鏈抗原的目的。

本發(fā)明提供了一種涎液化糖鏈抗原磁微粒化學(xué)發(fā)光檢測用試劑，包括磁微粒試劑和吖啶酯試劑；

所述磁微粒試劑包括2～8μg/ml磁微粒標(biāo)記的KL-6抗體1、體積濃度20％～30％初生牛血清、質(zhì)量濃度0.01％～0.1％的Proclin300、體積濃度20％～30％甘油、體積濃度0.01％～0.1％吐溫20、質(zhì)量濃度0.1％～1％BSA和體積濃度50％～70％pH值為7.4的PBS緩沖液；

所述吖啶酯試劑包括6～10μg/ml吖啶酯標(biāo)記的KL-6抗體2、體積濃度10％～40％的甘油、質(zhì)量濃度0.5％～5％的BSA和60％～90％、pH值為7.4的PBS緩沖液。

優(yōu)選的，所述磁微粒標(biāo)記的KL-6抗體1中KL-6抗體1為北京博爾邁生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的貨號為8MKL-61SA的KL-6單克隆抗體。

優(yōu)選的，所述吖啶酯標(biāo)記的KL-6抗體2中KL-6抗體2為北京博爾邁生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的貨號為8MKL-62SA的KL-6單克隆抗體。

優(yōu)選的，還包括磁珠清洗液、化學(xué)發(fā)光試劑和KL-6標(biāo)準(zhǔn)品。

優(yōu)選的，所述磁珠清洗液包括含體積濃度0.01％～0.1％Proclin300、0.2M的2-(N-嗎啉代)乙磺酸的水溶液。

本發(fā)明提供了一種所述涎液化糖鏈抗原磁微粒化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒，包括所述試劑。

本發(fā)明提供了所述涎液化糖鏈抗原磁微粒化學(xué)發(fā)光檢測用試劑或所述試劑盒在非診斷目的的檢測血液樣本中KL-6含量的應(yīng)用。