[發明專利]一種他克莫司軟膏有關物質測定的前處理方法

有效

• 申請號: 202110154476.0
• 申請日: 2021-02-04
• 公開（公告）號: CN112730704B
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發明（設計）人: 魏宗有;王娟;陳宇翔;江寧宇;陳韡彬;范建輝
• 申請（專利權）人: 福建省微生物研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 修斯文;蔡學俊

1.一種他克莫司軟膏有關物質測定的前處理方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）樣品提取：稱取適量他克莫司軟膏于玻璃離心管中，加入正己烷-丙酮混合溶液，劇烈振蕩至混懸完全后低溫靜置，再以4000r/min離心5min，取上清液，重復提取1次后，合并上清液；

（2）固相萃取柱分離：將步驟（1）所得上清液全部轉移入固相萃取柱，再用正己烷-乙酸乙酯混合溶液進行淋洗，之后依次加入乙酸乙酯、乙腈進行洗脫，分別收集乙酸乙酯和乙腈的洗脫液并合并所有洗脫液，將其旋轉蒸干，再在所得殘留物中加入少量正己烷-正丁基氯-乙腈混合溶液，渦旋使殘留物溶解后，所得溶液經微孔濾膜過濾后用于HPLC定性測定；

步驟（1）中所述低溫靜置的溫度為-50~-5℃，時間為20-40min。

2.根據權利要求1所述的他克莫司軟膏有關物質測定的前處理方法，其特征在于，步驟（1）中所用他克莫司軟膏與正己烷-丙酮混合溶液的質量體積比為1g:5mL；

所述正己烷-丙酮混合溶液中正己烷與丙酮的體積比為5:1-15:1。

3.根據權利要求1所述的他克莫司軟膏有關物質測定的前處理方法，其特征在于，步驟（2）所用正己烷-乙酸乙酯混合溶液與上清液的體積比為3:1；

所述正己烷-乙酸乙酯混合溶液中正己烷與乙酸乙酯的體積比為1:1-10:1。

4.根據權利要求1所述的他克莫司軟膏有關物質測定的前處理方法，其特征在于，步驟（2）中用于洗脫的乙酸乙酯及乙腈與上清液的體積比均為1:2。

5.根據權利要求1所述的他克莫司軟膏有關物質測定的前處理方法，其特征在于，步驟（2）所述正己烷-正丁基氯-乙腈混合溶液中正己烷、正丁基氯與乙腈的體積比為1:1:1。