[發(fā)明專利]一種以腺病毒為載體的冠狀病毒疫苗及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110144105.4 | 申請日： | 2021-02-02 |
| 公開（公告）號： | CN113248577B | 公開（公告）日： | 2022-10-21 |
| 發(fā)明（設計）人： | 高強;鄭澤宇;吳慕勝;王治偉;呂哲 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京科興中維生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/165 | 分類號： | C07K14/165;C12N15/50;C12N15/861;C12N5/10;A61K39/215;A61K39/39;A61P31/14;A61P11/00;A61P13/12;A61P1/00;A61P9/04 |
| 代理公司： | 北京睿陽聯(lián)合知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11758 | 代理人： | 郭奧博;張穎 |
| 地址： | 100085 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 病毒 載體 冠狀病毒 疫苗 及其 制備 方法 | ||
本發(fā)明涉及以腺病毒為載體的冠狀病毒疫苗的目的氨基酸序列、目的基因序列、包含所述目的基因序列的腺病毒載體、外源轉(zhuǎn)入所述腺病毒載體的細胞以及以包含所述目的氨基酸序列的冠狀病毒疫苗。本發(fā)明提供了5種冠狀病毒疫苗的目標氨基酸以及相應的基因序列，進一步使用腺病毒為載體，以整合腺病毒E1基因的細胞為包裝細胞系，經(jīng)包裝獲得重組腺病毒載體冠狀病毒疫苗。本發(fā)明提供的冠狀病毒疫苗可以快速制備，適用于新型冠狀病毒2019?nCoV的預防，具有良好的免疫原性，可以誘導高水平的抗體表達。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及流行病預防及疫苗生產(chǎn)領(lǐng)域，具體涉及一種以腺病毒 為載體的冠狀病毒疫苗及其制備方法。
背景技術(shù)
新型冠狀病毒2019-nCoV(WHO命名)是一種以前尚未在人類中 發(fā)現(xiàn)的新型冠狀病毒。國際病毒分類委員會于2020年2月將新型冠狀 病毒(2019-nCoV)的正式分類名確定為嚴重急性呼吸綜合征冠狀病 毒2，英文縮寫SARS-CoV-2(severe acute respiratorysyndrome coronavirus 2)。WHO于2020年2月將由新型冠狀病毒2019-nCoV引發(fā) 的疾病命名為2019冠狀病毒病，英文縮寫COVID-19(Corona Virus Disease 2019)。
冠狀病毒屬于套氏病毒目，冠狀病毒科，冠狀病毒屬，是一類 具有囊膜、基因組為線性單股正鏈RNA的病毒，是自然界中廣泛存 在的一大類病毒，引起的疾病患者表現(xiàn)為從普通感冒到嚴重肺部感 染等不同的臨床癥狀，例如中東呼吸綜合征(MERS)和嚴重急性呼吸道綜合癥(SARS)。2019-nCoV與SARS-CoV同屬于冠狀病毒β 家族。現(xiàn)亟需開發(fā)能夠有效預防引起新型冠狀病毒2019-nCoV感染 的疫苗，用于有效防止新型冠狀病毒2019-nCoV感染引起的肺炎， 甚至是嚴重呼吸道感染在全世界范圍內(nèi)的蔓延。
目前應用于人體的預防病毒感染的疫苗主要包括采用病毒經(jīng)減 毒后制備的減毒活疫苗，如水痘減毒活疫苗、麻疹減毒活疫苗等；以 及滅活全病毒顆粒疫苗，如腸道病毒EV71型滅活疫苗、甲型肝炎疫 苗等。然而，減毒疫苗要費很長時間使病毒繁殖許多代，然后逐漸減 除病毒的大部分活性，難以滿足急性傳染病的預防需要。滅活疫苗則 在免疫病理方面存在許多難以解決的問題，例如有些滅活病毒進入人 體會在病毒入侵時加重病情。
隨著分子生物學技術(shù)和遺傳操作技術(shù)的廣泛應用，重組病毒載體 疫苗得到了很大的發(fā)展。重組病毒載體疫苗的種類有很多，如痘病毒 活載體疫苗、腺病毒載體疫苗、反轉(zhuǎn)錄病毒載體疫苗、不分節(jié)段的單 股RNA病毒載體疫苗等。這些病毒載體因病毒基因組的復制特定和病 毒生物學特性的不同，而適合于不同動物和人類疾病的預防與治療。 病毒載體疫苗能夠克服傳統(tǒng)疫苗的一些弊端，有助于區(qū)分野毒感染和 疫苗接種，從而達到預防、治療甚至凈化傳染病的目的。
發(fā)明內(nèi)容
冠狀病毒2019-nCoV編碼的蛋白包括RNA聚合酶蛋白、纖突 蛋白、包膜蛋白、膜蛋白和核衣殼蛋白。其中，纖突蛋白(Spike蛋 白，下文簡稱S蛋白)為糖蛋白。該蛋白既是誘導保護性免疫應答 的決定因素，又是與宿主細胞血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2 (angiotensin-converting enzyme 2，ACE2)受體結(jié)合的部位。且在 小鼠和非洲綠猴中，S蛋白已被證實可誘導血清中和抗體產(chǎn)生，后 者具有中和SARS-CoV的作用。另外，S蛋白可誘導CD4+和CD8+T細胞應答。因此，本發(fā)明選擇S蛋白作為靶標進行冠狀病毒疫苗的 研發(fā)。
本發(fā)明的第一目的是提供以腺病毒為載體的冠狀病毒疫苗的目 的氨基酸序列，包括含有SEQ1、SEQ2、SEQ3、SEQ4和SEQ5中的一 個或多個氨基酸序列，或與其相似度為90％以上的氨基酸序列。所述 氨基酸序列參見本發(fā)明的序列表。
本發(fā)明的第二目的是提供所述冠狀病毒疫苗的目的基因序列， 其包括編碼SEQ1、SEQ2、SEQ3、SEQ4和SEQ5中的一個或多個 氨基酸序列或與其相似度為90％以上的氨基酸序列的DNA序列。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于北京科興中維生物技術(shù)有限公司，未經(jīng)北京科興中維生物技術(shù)有限公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202110144105.4/2.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
