[發明專利]一種過表達SMAD3誘導體細胞重編程為乳腺上皮細胞的方法

有效

• 申請號: 202110143147.6
• 申請日: 2021-02-02
• 公開（公告）號: CN112831473B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 黃奔;張丹丹;吳玉蓮;劉權輝;朱少倩;胡吉剛
• 申請（專利權）人: 廣西大學;廣西犇彭生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/867;C12N15/12
• 代理公司: 天津企興智財知識產權代理有限公司 12226
• 代理人: 馬倩倩

1.使SMAD3基因過表達在誘導體細胞重編程為乳腺上皮細胞方面的用途，所述體細胞為山羊的成纖維細胞；誘導所述體細胞重編程為乳腺上皮細胞的誘導培養基為：包括基礎液、KSR、非必需氨基酸、β-巰基乙醇，各組分體積比為78:20:1:1，且培養基包括VPA、Forskolin、Tranylcypromine、TTNPB，濃度分別為0.5mM，10μM，10μM以及1μM；所述基礎液為N2B27，包括Knockout DMEM/F12、N2(100×)、Neurobasal、B27(50×)、Glutamine(100×)；且組分體積比為99:1:97:2:1。

2.如權利要求1所述的用途，其特征在于，使所述SMAD3基因過表達的方式包括：(1)構建SMAD3慢病毒載體并轉染體細胞，(2)使用小分子物質促進SMAD3過表達誘導的重編程，其中，用于促進該重編程的小分子物質為小分子肽、mRNA、或激酶。

3.一種誘導體細胞重編程為乳腺上皮細胞的方法，包括下述步驟：(1)構建過表達SMAD3慢病毒載體；(2)使過表達SMAD3慢病毒載體轉染體細胞；(3)使用誘導培養基誘導轉染后的體細胞重編程為乳腺上皮細胞；其中體細胞為山羊的成纖維細胞；誘導所述體細胞重編程為乳腺上皮細胞的誘導培養基為：包括基礎液、KSR、非必需氨基酸、β-巰基乙醇，各組分體積比為78:20:1:1，且培養基包括VPA、Forskolin、Tranylcypromine、TTNPB，濃度分別為0.5mM，10μM，10μM以及1μM；所述基礎液為N2B27，包括Knockout DMEM/F12、N2(100×)、Neurobasal、B27(50×)、Glutamine(100×)；且組分體積比為99:1:97:2:1。