[發明專利]m6

在審

• 申請號: 202110140342.3
• 申請日: 2021-02-02
• 公開（公告）號: CN113652491A
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發明（設計）人: 張文娟;林輝;張文姬;賴彩云;吳帆;彭欣悅;余素素;張露云;周鋮
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;G01N33/68;G01N33/573
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

本發明公開了m⁶A RNA甲基化含量及其甲基化相關酶和結合蛋白在制備衰老檢測試劑盒中的應用。本發明的衰老檢測試劑盒通過檢測m⁶A RNA甲基化含量、RNA甲基化酶METTL3、METTL14、WTAP和KIAA1429，m⁶A RNA去甲基化酶FTO和ALKBH5以及m⁶A RNA甲基化結合蛋白YTHDC1、YTHDF1和YTHDF2蛋白表達量判斷細胞衰老；而RNA甲基化酶METTL3高表達還是低表達用于鑒定細胞早衰還是正常的復制性衰老。本發明可用于早衰、復制性衰老以及衰老相關疾患的評估，具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明涉及生物醫學技術領域，特別涉及m⁶A RNA甲基化含量及其甲基化相關酶和結合蛋白在制備衰老檢測試劑盒中的應用。

背景技術

細胞衰老，即復制性衰老，是一個復雜的生物學過程，細胞生理功能漸進性失調，增殖衰退，細胞周期永久性阻滯。細胞衰老與許多年齡相關疾患的發生發展密切相關，如動脈粥樣硬化、骨關節炎、阿爾茨海默病、老年性黃斑變性、2型糖尿病和癌癥等等，細胞呈現一種慢性及低度的非細菌性炎癥狀態。外源性環境因素，如紫外線、化療等可加速細胞衰老的進程，引起急性衰老現象發生，即為早衰。早衰的發生，更早的使人體伴隨著機體器官功能下降，使年齡相關疾病的風險增加，降低人們的生活質量。

目前，在細胞衰老研究中涉及的檢測指標包括衰老相關的β-半乳糖苷酶、端粒和端粒酶、衰老相關的異染色質灶、衰老相關的分泌表型、活性氧簇以及腫瘤抑制基因p53和p16等。這些檢測指標在衰老研究中被廣泛應用，各具特點。然而，關于細胞早衰的檢測和鑒定，目前尚無相關專利報道。

細胞早衰與復制性衰老雖具有許多類似的表型特征，但內在調控機制存在差異。在早衰的細胞中，存在核基因組DNA甲基化和整體組蛋白修飾的規律性變化，核及線粒體表觀基因組微環境不穩定，衰老相關特異基因的表觀遺傳學修飾的變化。其中，RNA甲基化修飾是表觀遺傳學嶄新的研究領域，m⁶A RNA 甲基化是RNA表觀轉錄組學新的調控機制，在機體正常生理功能維持中起重要作用，參與調控癌癥、糖尿病、心功能和免疫功能改變等年齡相關疾患。

經查詢，在衰老診斷領域，有四項專利相關，分別是“指征健康衰老關鍵通路的血清蛋白質標志物及應用(申請公布號：CN111366736A)”、“健康衰老血清蛋白標志物及應用(申請公布號：CN111337688A)”、“健康衰老診斷circRNA 標志物及應用(申請公布號：CN111424079A)”、“指示健康衰老關鍵通路的 circRNA小分子標志物及應用(申請公布號：CN111363802A)”。以上發明專利涉及健康衰老的診斷領域，以circRNA和血清標志物為主。

發明內容

本發明的首要目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供m⁶A RNA甲基化含量及其甲基化相關酶和結合蛋白在制備衰老檢測試劑盒中的應用。

本發明的另一目的在于提供一種衰老檢測試劑盒。

本發明的目的通過下述技術方案實現：m⁶A RNA甲基化含量及其甲基化相關酶和結合蛋白在制備衰老檢測試劑盒中的應用。

所述衰老包括復制性衰老(即正常衰老過程)和氧化應激誘導的早衰。

所述細胞是隨年齡增加而逐漸衰老的細胞；優選為人胚肺成纖維細胞。

所述衰老檢測試劑盒是通過檢測m⁶A RNA甲基化含量、RNA甲基化相關酶及結合蛋白的蛋白表達量，將其作為標志物判斷細胞衰老。

所述RNA甲基化相關酶包括RNA甲基化酶和RNA去甲基化酶。

所述RNA甲基化酶為METTL3、METTL14、WTAP和KIAA1429。