[發明專利]一種髓母細胞瘤細胞的3D培養方法及其在藥物篩選中的應用有效
| 申請號: | 202110132989.1 | 申請日: | 2021-02-01 |
| 公開(公告)號: | CN112813029B | 公開(公告)日: | 2023-08-18 |
| 發明(設計)人: | 吳春勇;何原子;張峻穎;康立峰;陳俊根;莊肯 | 申請(專利權)人: | 中國藥科大學 |
| 主分類號: | C12N5/09 | 分類號: | C12N5/09;C12Q1/02 |
| 代理公司: | 北京君有知識產權代理事務所(普通合伙) 11630 | 代理人: | 焦麗雅 |
| 地址: | 211198 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 細胞 培養 方法 及其 藥物 篩選 中的 應用 | ||
1.一種髓母細胞瘤細胞的3D培養體系,其特征在于,包括3D羥丙基纖維素微孔支架和髓母細胞瘤3D球樣體專用培養基,所述3D球樣體專用培養基為MEM基礎培養基添加10%(v:v)胎牛血清和1%(v:v)非必需氨基酸,
其中,所述非必需氨基酸為890mg/l?L-丙氨酸、1470mg/l?L-谷氨酸、1320mg/l?L-天冬酰胺、1330mg/l?L-天(門)冬氨酸、1150mg/l?L-脯氨酸、1050mg/l?L-絲氨酸和750mg/l甘氨酸的混合溶液。
2.一種培養髓母細胞瘤細胞的方法,包括以下步驟:使用權利要求1所述髓母細胞瘤細胞的3D培養體系培養髓母細胞瘤細胞。
3.如權利要求2所述的培養髓母細胞瘤細胞的方法,所述髓母細胞瘤細胞為人髓母細胞瘤DAOY細胞系,由平面擴增或凍存復蘇后的DAOY細胞系制備而成。
4.如權利要求2或3所述的培養髓母細胞瘤細胞的方法,其中,培養條件為溫度37℃,CO2體積濃度為5%。
5.如權利要求2或3所述的培養髓母細胞瘤細胞的方法,其中,髓母細胞瘤細胞的接種密度為1-5×106個細胞/ml。
6.權利要求1所述的髓母細胞瘤細胞的3D培養體系在藥物篩選和細胞活力檢測中的應用。
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