[發明專利]一種細胞殺傷效力的檢測方法、系統及其應用

有效

• 申請號: 202110127301.0
• 申請日: 2021-01-29
• 公開（公告）號: CN112813133B
• 公開（公告）日: 2022-07-15
• 發明（設計）人: 姜晶
• 申請（專利權）人: 上海睿鈺生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;G01N21/64
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種非疾病診斷與治療的細胞殺傷效力的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括如下步驟：

獲取細胞計數板上共培養樣品的明場顯微圖像，所述明場顯微圖像使用明場通道拍攝得到，其中，

所述共培養樣品為靶細胞與效應細胞共培養得到的細胞樣品，

所述靶細胞攜帶第一熒光標記，

所述共培養樣品至少使用一種第二熒光標記進行染色標記，

所述第一熒光標記與所述第二熒光標記對應的激發光波長不同；

獲取所述共培養樣品的第一熒光顯微圖像，所述第一熒光顯微圖像使用與所述第一熒光標記匹配的通道拍攝得到；

獲取所述共培養樣品的至少一張第二熒光顯微圖像，所述至少一張第二熒光顯微圖像使用與所述第二熒光標記匹配的通道拍攝得到；

對所述明場顯微圖像、所述第一熒光顯微圖像及所述至少一張第二熒光顯微圖像進行疊加合成分析并計數，得到細胞殺傷效力的檢測結果，所述檢測結果包括靶細胞死亡率和效應細胞死亡率；

所述計數后得到的計數結果包括：靶細胞和效應細胞總數、靶細胞總數、活靶細胞數、死靶細胞數、效應細胞總數、活效應細胞數或死效應細胞數中的任意一種或至少兩種的組合；

所述第二熒光標記為死細胞標記物，所述第二熒光顯微圖像為死細胞標記熒光顯微圖像，對所述明場顯微圖像、所述第一熒光顯微圖像及所述死細胞標記熒光顯微圖像進行疊加合成分析并計數包括：

識別所述明場顯微圖像中的細胞，并將存在于所述第一熒光顯微圖像中的細胞判定為靶細胞，并將不存在于所述第一熒光顯微圖像中的細胞判定為效應細胞；

而后，標示所述靶細胞和效應細胞的位置，其中，

標示所述明場顯微圖像中的所有細胞并統計數目，得到靶細胞和效應細胞總數；

標示所述明場顯微圖像和所述第一熒光顯微圖像中的細胞并統計數目，得到靶細胞總數，標示存在于所述明場顯微圖像和所述第一熒光顯微圖像中且不存在于死細胞標記熒光顯微圖像中的細胞并統計數目，得到活靶細胞數，標示同時存在于所述明場顯微圖像、所述第一熒光顯微圖像和所述死細胞標記熒光顯微圖像中的細胞并統計數目，得到死靶細胞數；

標示存在于所述明場顯微圖像且不存在于所述第一熒光顯微圖像并統計數目，得到效應細胞總數，標示僅存在于所述明場顯微圖像中的細胞并統計數目，得到活效應細胞數，標示存在于所述明場顯微圖像、所述死細胞標記熒光顯微圖像且不存在于第一熒光顯微圖像的細胞并統計數目，得到死效應細胞數。