[發(fā)明專利]一種細(xì)胞殺傷效力的檢測(cè)方法、系統(tǒng)及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110127301.0
• 申請(qǐng)日: 2021-01-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112813133B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-07-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姜晶
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海睿鈺生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/02
• 分類號(hào): C12Q1/02;G01N21/64
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種非疾病診斷與治療的細(xì)胞殺傷效力的檢測(cè)方法，其特征在于，所述檢測(cè)方法包括如下步驟：

獲取細(xì)胞計(jì)數(shù)板上共培養(yǎng)樣品的明場(chǎng)顯微圖像，所述明場(chǎng)顯微圖像使用明場(chǎng)通道拍攝得到，其中，

所述共培養(yǎng)樣品為靶細(xì)胞與效應(yīng)細(xì)胞共培養(yǎng)得到的細(xì)胞樣品，

所述靶細(xì)胞攜帶第一熒光標(biāo)記，

所述共培養(yǎng)樣品至少使用一種第二熒光標(biāo)記進(jìn)行染色標(biāo)記，

所述第一熒光標(biāo)記與所述第二熒光標(biāo)記對(duì)應(yīng)的激發(fā)光波長(zhǎng)不同；

獲取所述共培養(yǎng)樣品的第一熒光顯微圖像，所述第一熒光顯微圖像使用與所述第一熒光標(biāo)記匹配的通道拍攝得到；

獲取所述共培養(yǎng)樣品的至少一張第二熒光顯微圖像，所述至少一張第二熒光顯微圖像使用與所述第二熒光標(biāo)記匹配的通道拍攝得到；

對(duì)所述明場(chǎng)顯微圖像、所述第一熒光顯微圖像及所述至少一張第二熒光顯微圖像進(jìn)行疊加合成分析并計(jì)數(shù)，得到細(xì)胞殺傷效力的檢測(cè)結(jié)果，所述檢測(cè)結(jié)果包括靶細(xì)胞死亡率和效應(yīng)細(xì)胞死亡率；

所述計(jì)數(shù)后得到的計(jì)數(shù)結(jié)果包括：靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞總數(shù)、靶細(xì)胞總數(shù)、活靶細(xì)胞數(shù)、死靶細(xì)胞數(shù)、效應(yīng)細(xì)胞總數(shù)、活效應(yīng)細(xì)胞數(shù)或死效應(yīng)細(xì)胞數(shù)中的任意一種或至少兩種的組合；

所述第二熒光標(biāo)記為死細(xì)胞標(biāo)記物，所述第二熒光顯微圖像為死細(xì)胞標(biāo)記熒光顯微圖像，對(duì)所述明場(chǎng)顯微圖像、所述第一熒光顯微圖像及所述死細(xì)胞標(biāo)記熒光顯微圖像進(jìn)行疊加合成分析并計(jì)數(shù)包括：

識(shí)別所述明場(chǎng)顯微圖像中的細(xì)胞，并將存在于所述第一熒光顯微圖像中的細(xì)胞判定為靶細(xì)胞，并將不存在于所述第一熒光顯微圖像中的細(xì)胞判定為效應(yīng)細(xì)胞；

而后，標(biāo)示所述靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞的位置，其中，

標(biāo)示所述明場(chǎng)顯微圖像中的所有細(xì)胞并統(tǒng)計(jì)數(shù)目，得到靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞總數(shù)；

標(biāo)示所述明場(chǎng)顯微圖像和所述第一熒光顯微圖像中的細(xì)胞并統(tǒng)計(jì)數(shù)目，得到靶細(xì)胞總數(shù)，標(biāo)示存在于所述明場(chǎng)顯微圖像和所述第一熒光顯微圖像中且不存在于死細(xì)胞標(biāo)記熒光顯微圖像中的細(xì)胞并統(tǒng)計(jì)數(shù)目，得到活靶細(xì)胞數(shù)，標(biāo)示同時(shí)存在于所述明場(chǎng)顯微圖像、所述第一熒光顯微圖像和所述死細(xì)胞標(biāo)記熒光顯微圖像中的細(xì)胞并統(tǒng)計(jì)數(shù)目，得到死靶細(xì)胞數(shù)；

標(biāo)示存在于所述明場(chǎng)顯微圖像且不存在于所述第一熒光顯微圖像并統(tǒng)計(jì)數(shù)目，得到效應(yīng)細(xì)胞總數(shù)，標(biāo)示僅存在于所述明場(chǎng)顯微圖像中的細(xì)胞并統(tǒng)計(jì)數(shù)目，得到活效應(yīng)細(xì)胞數(shù)，標(biāo)示存在于所述明場(chǎng)顯微圖像、所述死細(xì)胞標(biāo)記熒光顯微圖像且不存在于第一熒光顯微圖像的細(xì)胞并統(tǒng)計(jì)數(shù)目，得到死效應(yīng)細(xì)胞數(shù)。