[發(fā)明專利]一種基于PDA@Fe3O4-MWCNTs檢測食用植物油中多種真菌毒素的方法

有效

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• 申請日: 2021-01-25
• 公開（公告）號: CN112924574B
• 公開（公告）日: 2022-03-15
• 發(fā)明（設計）人: 孫秀蘭;徐洪文;孫嘉笛;紀劍;張銀志;葉永麗
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產(chǎn)權代理有限公司 23211
• 代理人: 林娟

1.一種基于PDA@Fe₃O₄-MWCNTs檢測食用植物油中多種真菌毒素的方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）在油樣溶液中加入提取液進行提取；之后離心、取下層提取液加水混合均勻，離心，取上清液過膜，得到預處理的油樣；其中所述的提取液為乙腈、水、乙酸的混合溶液，混合溶液中乙腈、水、乙酸的體積比為84：15：1；油樣和提取液的比例以g/mL計為5-5.1：10；下層提取液和水的體積比為1：1；

（2）在PDA@Fe₃O₄-MWCNTs中加入步驟（1）得到的預處理的油樣，混合均勻進行吸附10min；吸附完成后分離得到沉淀；之后在沉淀中加入解析劑進行洗脫，收集洗脫液，氮氣吹干，殘留物供柱前衍生化用，衍生后的溶液經(jīng)氮氣吹干得到殘留物；之后殘留物復溶，得到待測油樣；其中所述的解析劑為乙腈、水、乙酸的混合溶液，混合溶液中乙腈、水、乙酸的體積比為84：15：1；預處理的油樣的pH為7；預處理油樣和解析劑的體積比為1：2；PDA@Fe₃O₄-MWCNTs和預處理油樣的比例以mg/mL計為50：1；柱前衍生化為在盛有殘留物的離心管中加入衍生試劑200 μL正己烷和100 μL三氟乙酸，振蕩30 s，40 ℃水浴條件下衍生15 min；

（3）采用高效液相色譜儀對待測油樣進行檢測，得到多種毒素的吸收峰面積；之后根據(jù)標準曲線得到油樣中多種毒素的含量；其中，采用高效液相色譜儀進行待測油樣分析，色譜條件為：色譜柱：Agilent XDB-C18 4.6 mm×150 mm, 3.5 μm；柱溫40 ℃；流速0.6 mL/min，進樣體積10 μL；熒光檢測器，檢測波長：AFB1、AFB2、AFG1、AFG2激發(fā)波長365 nm，發(fā)射波長460 nm；OTA和OTB激發(fā)波長327 nm，發(fā)射波長460 nm；流動相：A為甲醇，B為0.05%甲酸，梯度洗脫如下：

所述的多種真菌毒素為黃曲霉毒素B₁、黃曲霉毒素B₂、黃曲霉毒素G₁、黃曲霉毒素G₂、赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B；

所述的PDA@Fe₃O₄-MWCNTs的制備方法，包括如下步驟：

將Fe₃O₄-MWCNTs和Tris-HCl緩沖溶液混合均勻，得到混合溶液；其中Fe₃O₄-MWCNTs和Tris-HCl緩沖溶液的比例以mg/mL計為3-5：1；在混合溶液中加入鹽酸多巴胺進行反應；其中Fe₃O₄-MWCNTs和多巴胺的質量比為1-3：1；反應結束后將沉淀分離出來，洗滌、干燥、得到PDA@Fe₃O₄-MWCNTs。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中所述的油樣溶液是油樣和石油醚的混合溶液；其中油樣和石油醚的比例以g/mL計為1：2。

3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中提取是采用超聲提取，提取時間為10-30 min。

4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中提取之后的離心是室溫下8000r/min離心10 min。

5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中加水混合均勻之后的離心為4℃，12000 r/min離心10 min。

6.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中所述的上清液過膜采用的濾膜的規(guī)格為0.22 μm。

7.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中所述的吸附是于振蕩器中以1500 r/min振搖10 min。

8.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中所述的分離是用外加磁鐵分離固液兩相。

9.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中氮氣吹干的條件為40 ℃，1 mL/min。