[發明專利]一種利用生物骨制備口腔用膠原蛋白基質材料的方法

有效

• 申請號: 202110089289.9
• 申請日: 2021-01-22
• 公開（公告）號: CN112807490B
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發明（設計）人: 許力心;孫慧;蔡飛翔
• 申請（專利權）人: 西嶺（鎮江）醫療科技有限公司
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36;A61L27/24
• 代理公司: 南京創略知識產權代理事務所(普通合伙) 32358
• 代理人: 王丹

本發明公開一種利用生物骨制備口腔用膠原蛋白基質材料的方法，通過將幼齡牛骨或豬骨切割后經去病毒、脫脂、脫蛋白、脫鈣、脫細胞、去內毒等處理后凍干，并再次剪切成需要的規格。整個工藝簡單，生產周期短，便于大規模批量生產。本發明選用幼齡牛骨或豬骨作原料，其來源豐富，減少降解誘發炎癥反應，并易于清除，避免植入人體后引起免疫排斥反應。且幼齡牛骨和豬骨材料具有良好的孔隙率和孔徑通道，與人骨孔隙類似，模擬人體微環境，有利于成骨細胞等種子細胞爬行通過，可以很好的促進軟組織愈合且成骨能力較好。另外，本發明采用在長流水狀態下甩干并清洗清除各處理步驟化學試劑，不僅速度快，而且清洗徹底無殘留，進一步保證產品使用的安全性。

技術領域

本發明涉及一種利用生物骨制備口腔用膠原蛋白基質材料的方法。

背景技術

在口腔疾病的醫療過程中，患者出現牙外傷、錯位牙、額外牙、滯留乳牙等口腔內牙齒不適時，常常需要拔牙手術。拔牙后即刻進行拔牙窩內填充材料移植，可支撐和充填牙槽窩，阻斷或減緩牙槽骨吸收，阻擋牙齦上皮或纖維組織進入拔牙窩，并能夠引導和促進拔牙窩的骨再生，實現牙槽骨的保存或增量。

目前，牙窩填充材料大體可分為人工合成材料和生物骨材料。其中，人工合成材料存在問題在于：一方面人工合成材料在人體內的降解速度不易控制，與牙周組織修復和拔牙窩的骨再生修復速度不同步；另一方面人工合成材料，如聚乳酸的降解產物會造成局部環境的強酸性，反而會對被修補組織的修復生長起到抑制作用，因此逐漸被生物骨材料所代替。生物骨材料多選用豬骨或牛骨材料制備的牙窩填充材料在人體內的降解速度幾乎能與組織修復速度同步，且降解產物也不會導致局部環境的改變，不影響牙周組織修復和拔牙窩的骨再生，有利于拔牙窩的骨再生。

然而，生物骨材料由于含有多種免疫原性物質，其必須經過一系列生物化學方法處理去除后才能使用，以避免發生免疫排斥反應。常用處理方法包含脫脂、脫細胞、去抗原、去病毒等步驟，在處理過程中要使用大量生物化學試劑，而殘留化學試劑的清洗去除也同樣重要。現有的生物骨材料制備過程中化學試劑清洗去除的方法多為采用清水直接洗滌或震蕩清洗。例如，中國專利文獻(CN110559485A)公布的一種生物組織基質材料及其制備方法與應用中生物組織基質材料，其化學試劑清洗為采用震蕩清洗，單個工藝步驟的震蕩清洗時間為6～80小時；再例如另一篇中國專利文獻(CN104174069A)公布的一種致密骨基質及其制備方法，其化學試劑清洗各個步驟均為使用清水直接洗滌。

但是，無論是使用清水直接洗滌還是震蕩清洗，均需要耗費較長時間，從而導致整個產品生產周期較長，不利于產品的大規模批量生產。而且，目前生物骨材料含有較多的雜蛋白、細胞、抗原等有機成分，清除不徹底的話，植入人體后容易引起免疫排斥反應，影響拔牙窩軟組織愈合。因此需要一種合理有效的生物骨制備口腔用膠原蛋白基質材料的方法，縮短產品生產周期，便于大規模批量生產，在保證產品的使用安全的同時，能促進拔牙窩軟組織愈合和牙槽骨的再生。

發明內容

針對上述存在的問題及為了達到上述的目的，本發明提供一種利用生物骨制備口腔用膠原蛋白基質材料的方法，選用幼齡的生物骨材料，切割清洗后采用在長流水狀態下甩干并清洗的方式對各處理步驟進行化學試劑清除，不僅速度快，而且清洗徹底無殘留。同時，具有良好的拔牙窩軟組織愈合和牙槽骨再生的功能。具體技術方案如下：

本發明提供一種利用生物骨制備口腔用膠原蛋白基質材料的方法，包括如下步驟：

(1)切割：將冷凍的幼齡生物骨原材料在常溫下化凍，并切割成一定寬度的條狀骨原料；

(2)清洗：反復沖洗切割后的條狀骨原料，直至沒有明顯血水和油脂；

(3)去病毒：配制NaOH溶液，將清洗后的條狀骨原料倒入NaOH溶液中，攪拌、浸泡后撈出，在長流水狀態下清洗并甩干；

(4)脫脂：配制三氯甲烷-甲醇混合溶液，將去病毒后的條狀骨原料倒入到混合溶液中，攪拌、浸泡后撈出，真空干燥脫除殘留的三氯甲烷和甲醇；