[發(fā)明專利]小分子干擾核糖核酸及其重組腺病毒與應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110086759.6 | 申請日: | 2021-01-22 |
| 公開(公告)號: | CN112725340A | 公開(公告)日: | 2021-04-30 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 裴楊莉;李奎;李華 | 申請(專利權(quán))人: | 佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院 |
| 主分類號: | C12N15/113 | 分類號: | C12N15/113;C12N15/861 |
| 代理公司: | 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205 | 代理人: | 劉俊文 |
| 地址: | 528000 廣東*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 分子 干擾 核糖核酸 及其 重組 病毒 應(yīng)用 | ||
1.小分子干擾核糖核酸,其特征在于,由正義鏈、反義鏈和環(huán)狀序列共同組成的shRNA,所述正義鏈和反義鏈選自以下任一組:
1)序列如SEQ ID№.1所示的正義鏈和序列如SEQ ID№.2所示的反義鏈;
2)序列如SEQ ID№.3所示的正義鏈和序列如SEQ ID№.4所示的反義鏈;
3)序列如SEQ ID№.5所示的正義鏈和序列如SEQ ID№.6所示的反義鏈。
2.含有如權(quán)利要求1所述的小分子干擾核糖核酸的原核、真核穿梭載體、腺病毒載體。
3.含有權(quán)利要求1所述的小分子干擾核糖核酸的重組腺病毒。
4.如權(quán)利要求3所述的重組腺病毒的應(yīng)用,其特征在于:所述重組腺病毒在抑制Rab32基因表達(dá)中的應(yīng)用。
5.如權(quán)利要求3所述的重組腺病毒的制備方法,其特征在于包括步驟:
A.合成權(quán)利要求1所述小分子干擾核糖核酸;
B.所述小分子干擾核糖核酸與穿梭載體進(jìn)行連接,獲得抑制Rab32基因表達(dá)的重組穿梭質(zhì)粒;
C.將步驟B所得重組穿梭質(zhì)粒線性化,轉(zhuǎn)化入制備好的含有腺病毒骨架質(zhì)粒pAdEasy-1的感受態(tài)細(xì)胞,通過細(xì)胞內(nèi)同源重組獲得抑制Rab32基因表達(dá)的重組腺病毒載體;
D.將步驟C所得重組腺病毒載體線性化后用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染慢病毒感染細(xì)胞,獲得抑制Rab32基因表達(dá)的重組腺病毒。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法,其特征在于,所述慢病毒感染細(xì)胞為293T。
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