[發明專利]一種沙門氏菌閉管快速可視化檢測試劑盒及其檢測方法有效
| 申請號： | 202110078752.X | 申請日： | 2021-01-21 |
| 公開（公告）號： | CN112391486B | 公開（公告）日： | 2021-04-23 |
| 發明（設計）人： | 許文濤;杜再慧;林晟豪;李佳樂 | 申請（專利權）人： | 中國農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/42 |
| 代理公司： | 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690 | 代理人： | 張丹 |
| 地址： | 100083 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 沙門氏菌 快速 可視化 檢測 試劑盒 及其 方法 | ||
1.一種沙門氏菌閉管快速可視化檢測試劑盒用于非疾病診斷目的的沙門氏菌閉管快速可視化檢測方法，其特征在于，所述試劑盒包含集成管、納米金增強的LAMP擴增體系及相關試劑；
所述集成管為自制螺口管，有管身和管蓋組成；且管蓋內側包含有風干的負染檢測試劑；
所述納米金增強的LAMP擴增體系包括LAMP擴增引物、dNTPs、甜菜堿、MgSO4、緩沖液、BstDNA聚合酶、納米金、石蠟油及水；
其中LAMP擴增引物包括：
inv A-F3引物：序列如SEQ ID NO：1；
inv A-B3引物：序列如SEQ ID NO：2；
FIP引物：序列如SEQ ID NO：3；
BIP引物：序列如SEQ ID NO：4；
所述負染檢測試劑為0.1 M CuSO4溶液；
所述方法采用前述納米金增強LAMP擴增體系對沙門氏菌基因組進行擴增，然后直接使用集成管對擴增產物進行檢測，所述擴增產物在集成管中上下顛倒幾次，將CuSO4與LAMP擴增體系混勻，1min內觀察溶液的變化：溶液上部出現環形聚集物，則無沙門氏菌；無環形聚集物，則含有沙門氏菌。
2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法的反應體系如下：
3.根據權利要求2所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法的反應體系如下：
4.根據權利要求1-3任一所述的檢測方法，其特征在于，所述擴增的反應程序為60-68℃ 10-50 min，70-90℃ 1-15 min。
5.根據權利要求4所述的檢測方法，其特征在于，所述擴增的反應程序為64℃ 30 min，80℃ 5 min。
6.權利要求1-5任一所述的檢測方法在食品安全檢測中的應用。
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