[發(fā)明專利]一種天然肉制品抗氧化護(hù)色劑的制備方法及應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110073456.0 | 申請(qǐng)日： | 2021-01-20 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN112521477B | 公開(kāi)（公告）日： | 2022-07-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 胡嘉淼;王培鑫;林少玲;曾紅亮;張怡;鄭寶東 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 福建農(nóng)林大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C07K14/46 | 分類號(hào)： | C07K14/46;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/14;C07K1/20;C07K1/16;A23B4/20;A23L5/41 |
| 代理公司： | 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 35100 | 代理人： | 饒文君;蔡學(xué)俊 |
| 地址： | 350002 福*** | 國(guó)省代碼： | 福建;35 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 天然 肉制品 氧化 護(hù)色劑 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種天然肉制品抗氧化護(hù)色劑的制備方法，其特征在于，所述護(hù)色劑的組成成分包括從帶魚(yú)魚(yú)肉提取、分離純化的抗氧化肽，所述抗氧化肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
其制備方法包括如下步驟：在帶魚(yú)魚(yú)肉粉末中加入蒸餾水，充分?jǐn)噭蚝蠹尤胫行缘鞍酌该附猓附饨Y(jié)束后離心收集上清液，并進(jìn)行抽濾，得到帶魚(yú)魚(yú)肉抗氧化肽酶解液；將帶魚(yú)魚(yú)肉抗氧化肽酶解液經(jīng)過(guò)截留分子量為3kDa的超濾膜超濾后收集濾液進(jìn)行冷凍干燥，得到帶魚(yú)魚(yú)肉抗氧化肽粉末；將帶魚(yú)魚(yú)肉抗氧化肽粉末溶解于蒸餾水，以水為流動(dòng)相，經(jīng)過(guò)一次Sephadex G-15凝膠柱層析后收集DPPH自由基清除率、羥基自由基清除率以及總抗氧化能力最高的一個(gè)組分，隨后該組分再經(jīng)過(guò)一次反向高效液相色譜純化后得到帶魚(yú)魚(yú)肉抗氧化肽；每次純化后檢測(cè)主要組分DPPH自由基清除率、羥基自由基清除率以及總抗氧化能力，收集最強(qiáng)活性的組分，凍干后進(jìn)行下一次純化。
2.根據(jù)如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：具體包括如下步驟：
（1）原料預(yù)處理：將帶魚(yú)剔除魚(yú)鱗、魚(yú)鰭、頭部、魚(yú)尾、內(nèi)臟、魚(yú)骨后獲得帶魚(yú)魚(yú)肉，將帶魚(yú)魚(yú)肉絞成肉糜，并經(jīng)過(guò)風(fēng)干、粉碎制成帶魚(yú)魚(yú)肉粉末；
（2）抗氧化肽酶解液的制備：將帶魚(yú)魚(yú)肉與去離子水按1:4 g/mL的比例混合，調(diào)節(jié)pH至6.5-7.5；以1000-3000U/g的比例加入中性蛋白酶，在45℃水浴下酶解8-15h；酶解產(chǎn)物在沸水浴中加熱20 min使酶失活，并在4℃、8000 rpm條件下離心20 min，收集上清液并抽濾獲得帶魚(yú)魚(yú)肉抗氧化肽酶解；
（3）抗氧化肽粗品的制備：將步驟（2）中的抗氧化肽酶解液通過(guò)截留分子量3kDa的超濾膜進(jìn)行超濾，超濾的流速為55-70r/min，超濾溫度為2-8℃，超濾結(jié)束后將濾液冷凍干燥獲得抗氧化肽粗品；
（4）抗氧化肽的初次純化：將步驟（3）所得抗氧化肽粗品按照質(zhì)量比為1：10-1：30與蒸餾水混勻，隨后通過(guò)Sephadex G-15凝膠柱層析進(jìn)行純化；Sephadex G-15凝膠柱的參數(shù)為：直徑2.6cm，柱長(zhǎng)80cm；流動(dòng)相：水；流速：0.5 mL/min；柱溫：25-30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：280mm；上樣量：3mL；收集主要峰檢測(cè)DPPH自由基清除率、羥基自由基清除率以及總抗氧化能力，收集活性最高的組分；
（5）抗氧化肽的第二次純化：將步驟（4）所收集的抗氧化肽濾出液進(jìn)行反向高效液相色譜純化，使用InerSustain C18色譜柱，其參數(shù)為直徑2.1mm，柱長(zhǎng)100mm，粒徑2um；柱溫：25~30℃；流速：1.000mL/min；進(jìn)樣量：10~20μL；檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm；洗脫程序?yàn)椋?~2min，流動(dòng)相A比例為95%，流動(dòng)相B比例為5%；2~20min，流動(dòng)相A比例95~5%線性降低，流動(dòng)相B比例5~95%線性升高；20~30min，流動(dòng)相A比例5~95%線性升高，流動(dòng)相B比例95~5%線性降低；所述流動(dòng)相A是濃度為0.1%三氟乙酸水溶液，流動(dòng)相B是濃度100%的乙腈。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于福建農(nóng)林大學(xué)，未經(jīng)福建農(nóng)林大學(xué)許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購(gòu)買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請(qǐng)聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202110073456.0/1.html，轉(zhuǎn)載請(qǐng)聲明來(lái)源鉆瓜專利網(wǎng)。
