[發明專利]一種檢測成纖維細胞活化蛋白的生物發光探針、及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110069909.2
• 申請日: 2021-01-19
• 公開（公告）號: CN112898293B
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發明（設計）人: 張玲;陳二超;盛志佳;薛運生;鄭友廣
• 申請（專利權）人: 徐州醫科大學
• 主分類號: C07D417/14
• 分類號: C07D417/14;C09K11/06;G01N21/76
• 代理公司: 南京思拓知識產權代理事務所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤

1.一種生物發光探針，其探針的結構式如下所示：

2.一種權利要求1所述的生物發光探針的制備方法，其特征在于，它包括以下步驟：

3.根據權利要求2所述的生物發光探針的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

第一步：在HATU和DIPEA存在的條件下，化合物I與化合物Boc-Gly-Pro-OH進行化學反應，制備化合物BL-NH₂-Boc；

第二步：化合物BL-NH₂-Boc與三氟乙酸和乙酸酐進行化學反應，制備化合物BL-NH₂-Ac；

第三步：在碳酸鉀存在的條件下，化合物BL-NH₂-Ac與D-半胱氨酸鹽酸鹽進行成環反應，制備化合物BL-FAP。

4.根據權利要求3所述的生物發光探針的制備方法，其特征在于，在第一步中，化合物I、化合物Boc-Gly-Pro-OH、HATU和DIPEA的摩爾比為1:1～2:1.5～2.5:1.5～2.5。

5.根據權利要求4所述的生物發光探針的制備方法，其特征在于，在第一步中，化合物I、化合物Boc-Gly-Pro-OH、HATU和DIPEA的摩爾比為1:1.5:2:2。

6.根據權利要求4或5所述的生物發光探針的制備方法，其特征在于，在第一步中，將化合物Boc-Gly-Pro-OH、HATU和DIPEA溶于無水二氯甲烷中，再滴加含化合物I的無水二氯甲烷溶液，于0～40℃進行化學反應，制備化合物BL-NH₂-Boc。

7.根據權利要求3所述的生物發光探針的制備方法，其特征在于，在第二步中，化合物BL-NH₂-Boc與三氟乙酸的質量體積比為5～10mg/mL；化合物BL-NH₂-Boc與乙酸酐的摩爾比為1:0.8～1.2。

8.根據權利要求7所述的生物發光探針的制備方法，其特征在于，在第二步中，化合物BL-NH₂-Boc與三氟乙酸的質量體積比為6.7mg/mL；化合物BL-NH₂-Boc與乙酸酐的摩爾比為1:0.87。

9.根據權利要求7或8所述的生物發光探針的制備方法，其特征在于，在第二步中，化合物BL-NH₂-Boc和三氟乙酸于10～40℃進行化學反應，制備中間體化合物；再將得到的中間體化合物與乙酸酐于10～40℃繼續進行化學反應，制備化合物BL-NH₂-Ac。

10.根據權利要求3所述的生物發光探針的制備方法，其特征在于，在第三步中，化合物BL-NH₂-Ac、D-半胱氨酸鹽酸鹽與碳酸鉀的摩爾比為1:1～2:1～2。

11.根據權利要求10所述的生物發光探針的制備方法，其特征在于，在第三步中，化合物BL-NH₂-Ac、D-半胱氨酸鹽酸鹽與碳酸鉀的摩爾比為1:1.5:1.5。

12.權利要求1所述的生物發光探針作為制備檢測成纖維細胞活化蛋白的試劑中的應用。

13.根據權利要求12所述的應用，其特征在于：所述的生物發光探針在制備檢測腫瘤細胞和組織內成纖維細胞活化蛋白的試劑中應用。